【摘 要】
：
目的:通过克隆环状RNA hsacirc0000254,构建过表达载体并初步鉴定其表达水平,为进一步的功能研究奠定基础。方法:人工合成hsacirc0000254的524 bp序列,用pGH克隆载体合成基因
【机 构】
：
宁波市中心血站; 浙江省中医院检验科; 浙江大学医学院附属第二医院输血科;
【基金项目】
：
宁波市自然科学基金项目(2017A610201);浙江省医药卫生科技计划项目(2018ky160);浙江省自然科学基金项目(LY17H200001;LY16H200005)
论文部分内容阅读
目的:通过克隆环状RNA hsacirc0000254,构建过表达载体并初步鉴定其表达水平,为进一步的功能研究奠定基础。方法:人工合成hsacirc0000254的524 bp序列,用pGH克隆载体合成基因,然后酶切目的片段,连接到慢病毒过表达载体pLCDH-ciR中,测序验证。筛选阳性克隆,分别以pLCDH-circ254（C254）、NC（pLCDH-ciR）转染293T细胞,培养40 h后收集细胞进行PCR检测及产物测序验证。结果:pLCDH-circ254表达载体经测序验证,测序峰图正常,且无杂峰或叠带,序列对比吻合,表明hsacirc0000254成功插入环状RNA表达载体pLCDHciR,过表达载体构建成功,表达效率高达1万倍。结论:成功构建hsacirc0000254表达载体,可高效表达hsacirc0000254。
其他文献
目的:探讨脂肪乳联合地屈孕酮治疗对主动免疫治疗不敏感的封闭抗体阴性复发性流产患者的效果观察。方法:将60例封闭抗体阴性,经过3个月主动免疫治疗封闭抗体仍未转阳的患者,
如何汉语化字母词,特别是人们早已习惯的字母词,在今天显得尤为迫切。本文从语言学角度出发,在指出用中文全称完全取代字母词的做法存在一些困难的同时,认为一般情况下用简缩
城市湿地是城市重要的生态基础,具有许多生态功能和社会服务功能,合理开发和利用湿地资源是促进城市可持续发展的重要因素。结合国内外有关城市湿地的研究,指出城市湿地的3R
为了对云南烤烟种植进行更为深入精细化研究,本文首先选择了云南德宏作为烤烟种植的典型研究区域,以生态适宜性为研究入口,从气候条件以及土壤条件等几个角度出发对德宏烤烟
<正>看罢张艺谋的《一个也不能少》,让我对我所从事的教学中的一些事情有了更深的认识。这不正是我们每每改作业时那些习惯性地没交作业的学生吗?我就谈谈自己是如何对待这些
目的优化流感病毒H5N1在Vero细胞上的培养条件。方法在Vero细胞上,用不同维持液[M199、M199+表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)、MEM、MEM+EGF、无血清培养基(s
三黄洗剂的制备工艺及临床应用青海省中医院黄红英，王玉香三黄洗剂为我院疮疡外科治疗各种皮肤病的常用外洗方剂之一，已在本院应用多年，患者反应效果良好，现将制备工艺及临床疗效
廉政教育在我国取得了较大成效,但在高校还有待加强宣传教育.在我国加强研究生内涵式教育的同时,需要注重学科发展的平衡性、理论与实践结合的实效性及专业内容的深度和广度.
针对无人机三维航迹规划算法中存在的规划时间过长的问题,提出了一种基于改进A＊算法的无人机三维航迹快速规划方法。该方法采用分层策略,首先利用基于动态时间规整（DTW）距离的改
精子体外处理技术辽宁省计划生育科研所李宏军综述少精子、精子活力低下、畸形精子、精液液化不良：精浆中存在抗精子抗体等引起的不育，在经内外科系统治疗都不能使精子质量改善