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[摘要] 目的 优选痛清颗粒中芍药苷与葛根素的提取工艺。方法 采用4因素3水平的正交试验设计法，以芍药苷、葛根素转移率综合评分为考核指标，筛选影响提取工艺的因素。结果 实验设计三因素没有显著性影响。结合生产实际需要，痛清颗粒中芍药苷与葛根素的最佳提取条件是：加入22倍量水提取3次（12，5，5），提取2 h （1.0，0.5，0.5）。结论 此条件为痛清颗粒中芍药苷和葛根素的最佳提取工艺。
[关键词] 痛清颗粒 葛根素
中图分类号：R927.2 文献标识：A 文章编号：
痛清颗粒是由白芍、葛根等中药精制而成的中药复方制剂，临床用于治疗头痛。白芍是毛茛科植物芍药（Paeonia lactiflora Pall.）的干燥根，性微寒，味苦、酸，具有养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗之功效。葛根是豆科植物野葛Pueraria lobata （Willd.）Ohwi的干燥根，性凉，味甘、辛，具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻的功效。本试验对其提取工艺进行了研究，以芍药苷、葛根素转移率为考核指标，采用综合评分的方法获得了最佳提取工艺。现报道如下。
一、仪器与试药
Waters高效液相色谱仪（美国）；16G-型高速离心机；SB5200 型超声清洗机（上海Branson公司）；AEL-40SM型电子天平（日本岛津）。甲醇、乙腈为色谱纯，乙醇为分析纯，水为重蒸水。白芍、葛根等药材经鉴定，符合2005版《中华人民共和國药典》标准。芍药苷、葛根素对照品购自中国药品生物制品检定所，批号110736-200525、110752-200209。
二、方法与结果
1、 正交设计
在查阅大量文献以及预实验的基础上，发现用水作为提取溶剂时均能较好提取芍药苷、葛根素等。我们选用L9（34）正交表，对加水量（A）、提取时间（B）、提取次数（C）三因素进行了考察，以芍药苷、葛根素转移率为考察指标，综合评分，优选最佳提取工艺。
2.、 含量测定
芍药苷
色谱条件：Lichrospher C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），Waters 515高效液相色谱仪；2487双波长紫外检测器；检测波长λ=230 nm；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）；流速为1.0 mL/min；0.5 AUFS；柱温30 ℃；进样量为5 μL。分别配制不同浓度的芍药苷对照品溶液，在上述色谱条件下进行测定，以芍药苷进样量（X）对峰面积（Y）进行线性拟合，回归方程为：Y=6 486 000X+32 616.756，r=0.999 7，结果在0.093～2.97 μg范围内线性关系良好。
葛根素
色谱条件：Lichrospher C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），Waters 515高效液相色谱仪；2487双波长紫外检测器；检测波长λ=250 nm；流动相为甲醇-水（25∶75）；流速为1.0 mL/min；0.5 AUFS；柱温30 ℃；进样量为5 μL。分别配制不同浓度的葛根素对照品溶液，在上述色谱条件下进行测定，以葛根素进样量（X）对峰面积（Y）进行线性拟合，回归方程为：Y=22 670 000X+15 521.725，r=0.999 9，结果在0.10～41.1 μg范围内线性关系良好。
3？、 水提样品处理与测定
取水提正交设计所得样品，分别用测定芍药苷和葛根素的流动相稀释不同的倍数，充分振摇，高速离心处理，上清液用0.2 μm的微孔滤膜过滤，所得样品分别在上述测定芍药苷和葛根素的色谱条件下进行测定。
4、 数据分析及实验结果
对正交试验测定的数据进行极差和方差分析， 痛清颗粒的正交试验数据极差分析表（略）注：综合评分（%）=芍药苷转移率×50%+葛根素转移率×50%。？？？
极差分析结果可知，因素影响C>B>A，但3因素3个水平之间均无显著性差异。由极差分析得出的最佳工艺组合是A3B1C3，即加水量为药材用量26倍，提取3次，第1次1.0 h，第2、3次每次各0.5 h，3次的加水量分别为14、6和6。最佳的实验组合是A2B2C3，芍药苷和葛根素的转移率均在90%以上，即加水量为22倍量，提取3次，分别提取1.5、1.0、0.5 h。对A3B1C3和A2B2C3进行重复实验，结果表明，两种有效成分的转移率均在85%以上，考虑到生产实际，选择最佳的提取工艺条件是A2B1C3。
三、 小结
提取时间是影响中成药生产中中药药效成分浸出的一个重要因素，一般认为长时间加热会破坏有效成分。本实验发现，多次短时间连续提取对芍药苷、葛根素的浸出有利，时间延长导致转移率下降。证明芍药苷与葛根素受热不稳定，易发生水解等化学反应，不宜长时间加热。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：化学工业出版社， 2005.68，273.
[2] 张晓燕，王金辉，李 铣.白芍的化学成分研究[J].沈阳药科大学学报， 2001，18（1）：30.
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[关键词] 痛清颗粒 葛根素
中图分类号：R927.2 文献标识：A 文章编号：
痛清颗粒是由白芍、葛根等中药精制而成的中药复方制剂，临床用于治疗头痛。白芍是毛茛科植物芍药（Paeonia lactiflora Pall.）的干燥根，性微寒，味苦、酸，具有养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗之功效。葛根是豆科植物野葛Pueraria lobata （Willd.）Ohwi的干燥根，性凉，味甘、辛，具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻的功效。本试验对其提取工艺进行了研究，以芍药苷、葛根素转移率为考核指标，采用综合评分的方法获得了最佳提取工艺。现报道如下。
一、仪器与试药
Waters高效液相色谱仪（美国）；16G-型高速离心机；SB5200 型超声清洗机（上海Branson公司）；AEL-40SM型电子天平（日本岛津）。甲醇、乙腈为色谱纯，乙醇为分析纯，水为重蒸水。白芍、葛根等药材经鉴定，符合2005版《中华人民共和國药典》标准。芍药苷、葛根素对照品购自中国药品生物制品检定所，批号110736-200525、110752-200209。
二、方法与结果
1、 正交设计
在查阅大量文献以及预实验的基础上，发现用水作为提取溶剂时均能较好提取芍药苷、葛根素等。我们选用L9（34）正交表，对加水量（A）、提取时间（B）、提取次数（C）三因素进行了考察，以芍药苷、葛根素转移率为考察指标，综合评分，优选最佳提取工艺。
2.、 含量测定
芍药苷
色谱条件：Lichrospher C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），Waters 515高效液相色谱仪；2487双波长紫外检测器；检测波长λ=230 nm；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）；流速为1.0 mL/min；0.5 AUFS；柱温30 ℃；进样量为5 μL。分别配制不同浓度的芍药苷对照品溶液，在上述色谱条件下进行测定，以芍药苷进样量（X）对峰面积（Y）进行线性拟合，回归方程为：Y=6 486 000X+32 616.756，r=0.999 7，结果在0.093～2.97 μg范围内线性关系良好。
葛根素
色谱条件：Lichrospher C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），Waters 515高效液相色谱仪；2487双波长紫外检测器；检测波长λ=250 nm；流动相为甲醇-水（25∶75）；流速为1.0 mL/min；0.5 AUFS；柱温30 ℃；进样量为5 μL。分别配制不同浓度的葛根素对照品溶液，在上述色谱条件下进行测定，以葛根素进样量（X）对峰面积（Y）进行线性拟合，回归方程为：Y=22 670 000X+15 521.725，r=0.999 9，结果在0.10～41.1 μg范围内线性关系良好。
3？、 水提样品处理与测定
取水提正交设计所得样品，分别用测定芍药苷和葛根素的流动相稀释不同的倍数，充分振摇，高速离心处理，上清液用0.2 μm的微孔滤膜过滤，所得样品分别在上述测定芍药苷和葛根素的色谱条件下进行测定。
4、 数据分析及实验结果
对正交试验测定的数据进行极差和方差分析， 痛清颗粒的正交试验数据极差分析表（略）注：综合评分（%）=芍药苷转移率×50%+葛根素转移率×50%。？？？
极差分析结果可知，因素影响C>B>A，但3因素3个水平之间均无显著性差异。由极差分析得出的最佳工艺组合是A3B1C3，即加水量为药材用量26倍，提取3次，第1次1.0 h，第2、3次每次各0.5 h，3次的加水量分别为14、6和6。最佳的实验组合是A2B2C3，芍药苷和葛根素的转移率均在90%以上，即加水量为22倍量，提取3次，分别提取1.5、1.0、0.5 h。对A3B1C3和A2B2C3进行重复实验，结果表明，两种有效成分的转移率均在85%以上，考虑到生产实际，选择最佳的提取工艺条件是A2B1C3。
三、 小结
提取时间是影响中成药生产中中药药效成分浸出的一个重要因素，一般认为长时间加热会破坏有效成分。本实验发现，多次短时间连续提取对芍药苷、葛根素的浸出有利，时间延长导致转移率下降。证明芍药苷与葛根素受热不稳定，易发生水解等化学反应，不宜长时间加热。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：化学工业出版社， 2005.68，273.
[2] 张晓燕，王金辉，李 铣.白芍的化学成分研究[J].沈阳药科大学学报， 2001，18（1）：30.
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