TLR7激动剂CL097对实验性自身免疫性葡萄膜炎中Th17细胞活性的促进作用

来源 :中华实验眼科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:klwxm
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景

研究表明,Toll样受体7(TLR7)在自身免疫性疾病中发挥重要作用,但TLR7在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)中是否通过树突状细胞(DCs)调控辅助性T淋巴细胞17(Th17)的作用机制鲜见报道。

目的

探讨TLR7激动剂CL097处理的小鼠骨髓树突状细胞(BMDCs)对光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)1-20-特异性Th17细胞的影响。

方法

采用C57BL/6小鼠股骨和胫骨分离小鼠骨髓细胞,将重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)及重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)加入培养基在体外定向诱导BMDCs,于诱导后第6天在培养基中加入5 μg/ml CL097作用8 h,对照组加入PBS,采用实时荧光定量PCR技术检测CL097处理组与对照组BMDCs中IL-6、IL-23、IL-1β及转化生长因子-β(TGF-β) mRNA的相对表达量。小鼠腹腔内注射百日咳毒素1 μg,注射后2 h将IRBP1-20与等容积含有结核分枝杆菌HR37RA的完全弗氏佐剂充分乳化后主动免疫C57BL/6小鼠,眼底检查参照Caspi 0~4分的标准进行炎症评分。免疫后第13天取眼球制作病理切片,苏木精-伊红染色后行组织病理学检查,并分离小鼠脾脏及淋巴结中IRBP1-20-特异性T细胞,分别与CL097处理组及对照组的BMDCs共培养5 d,收集细胞,采用实时荧光定量PCR技术检测2个组细胞中IL-17、γ干扰素(IFN-γ)、维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)和T细胞中表达的T盒21转录因子(T-bet)mRNA的相对表达量;采用流式细胞仪检测并分析CL097处理组和对照组Th1与Th17细胞比例的变化。

结果

EAU模型成功建立。实时荧光定量PCR检测结果显示,CL097处理组BMDCs中IL-6、IL-23、IL-1β mRNA的相对表达量明显高于对照组,差异均有统计学意义(t=4.560,P=0.045;t=5.476,P=0.032;t=17.240,P=0.003),而TGF-β mRNA相对表达量明显低于对照组,差异有统计学意义(t=10.410,P=0.009)。CL097处理组BMDCs与IRBP1-20-特异性T细胞共培养后,RORγt和IL-17 mRNA相对表达量较对照组明显升高,差异均有统计学意义(t=8.844,P=0.012;t=8.831,P=0.013),而CL097处理组中T-bet、IFN-γ mRNA的相对表达量与对照组比较差异均无统计学意义(t=2.078,P=0.173;t=1.082,P=0.393)。流式细胞仪检测证实,CL097处理组Th17细胞的百分比为(17.750±4.793)%,明显高于对照组的(10.240±3.173)%,差异有统计学意义(t=4.938,P=0.039),CL097处理组和对照组Th1细胞的百分比分别为(1.123±0.356)%和(1.060±0.384)%,差异无统计学意义(t=2.714,P=0.113)。

结论

TLR7激动剂CL097促进BMDCs分泌与Th17细胞极化相关的细胞因子,并促进IRBP1-20-特异性Th17细胞的分化。

其他文献
背景单纯研究中央角膜厚度(CCT)与角膜生物学特性的关系无法全面阐明角膜结构变化对角膜生物力学的影响。角膜体积(CV)是角膜形态结构的主要特征性参数之一,能更全面地反映角膜整
介绍了使用普通立式铣床对日本生产的气动螺丝刀内部一处传动活块应用加工的新工艺,使该活块零件达到使用精度要求,解决了进口气动工具无配件的问题。
结合粒子群优化算法的进化方程和免疫系统的克隆选择机制,提出一种组合优化算法。该算法有效利用了抗体的历史信息和抗体之间的合作,提高了种群的多样性和算法的收敛速度,并
在全球经济步入衰退的大背景下,中国政府应对金融危机、促进经济平稳较快发展的一揽子计划已初见成效,中国的市场经济环境呈现好转趋势。美国哈斯自动数控机械公司打铁趁热,
通过大量实验总结工艺参数,特别是激光功率、扫描速度和送粉速率对激光快速成形钛合金件表面质量影响的规律。综合比能量和粉流密度之间关系,得出激光快速成形工艺参数带;通
受全球金融危机的影响,2008年第四季度以来国内机床工具行业增速下滑加剧,特别是机床工具产品的出口形势变化之快令人担忧。国内外市场均受到金融危机的影响,机床制造业将面临严