【摘 要】
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构建AP-57/C10orf99重组表达载体,并在BL21中进行重组蛋白的表达。经纯化获得高纯度的AP-57,从而为其功能性研究提供基础。通过合成AP-57基因序列,连接入p ET32质粒中与Trx标
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31471286）资助
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构建AP-57/C10orf99重组表达载体,并在BL21中进行重组蛋白的表达。经纯化获得高纯度的AP-57,从而为其功能性研究提供基础。通过合成AP-57基因序列,连接入p ET32质粒中与Trx标签和His标签融合,转化进DH5α,经筛选、鉴定为阳性克隆菌落中提取的质粒转入基因工程化BL21中进行表达。通过优化表达条件如温度、诱导时间和诱导剂（IPTG）浓度来提高重组蛋白表达量。最后,通过亲和层析浓缩获得融合蛋白,去标签和阳离子交换层析、脱盐步骤获得纯的AP-57蛋白。结果是成功构建了AP-57的诱导
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