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摘要：为探讨桃胶多糖提取率的影响因素，本实验利用微波辅助提取法，以桃胶多糖提取率为指标，通过对料液比、微波功率、微波处理时间进行单因素实验，并在此基础上进行正交实验。结果表明，影响桃胶多糖提取率的因素顺序为：微波功率>水料比>微波处理时间。桃胶多糖的最佳提取工艺为：水料比60∶1（ml/g）、微波功率为600W、微波处理时间14min，在此条件下，桃胶多糖的提取率为74.7%。
关键词：桃胶，多糖，微波提取
桃胶是树木在受创部位渗出的黏性液体，暴露于空气中经风干后形成玻璃状的透明物质，一般呈深褐色或淡黄色。桃胶是由复杂的多糖类成分所组成[1]。植物多糖是中草药的重要活性成分，并具有多种生物活性和保健功能[2]，传统植物多糖提取多选择水提醇沉法，但桃胶胶质水溶后粘度较大，多糖难以扩散出来，传统方法提取的多糖提取率低。目前，对桃胶多糖提取还鲜见采用微波辅助提取的研究报道。故本实验利用微波辅助法提取桃胶多糖，在料液比、微波功率、微波处理时间三个单因素实验的基础上，通过正交实验确定桃胶多糖的最佳提取工艺条件，旨在为桃胶多糖的提取提供参考，也为进一步研究其生物学活性及产业化开发提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
桃胶 购于文山市三七市场；其余试剂均为国产分析纯。
UV—1200S 紫外可见分光光度计，上海翱艺仪器有限公司；YP2002 电子分析天平，上海佑科仪器仪表有限公司；R206B旋转蒸发器 上海申生科技有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 葡萄糖标准曲线的绘制[3]依据陈钧辉等《生物化学实验》制得葡萄糖标准曲线。其线性回归方程为y=0.0073x-0.0188，R2=0.9993。
1.2.2 桃胶多糖提取工艺流程 原桃胶→去杂→冷冻干燥→粉碎、过筛（80目）→准确称取5g →蒸馏水浸泡1h，微波提取两次→离心取上清液、滤渣重复浸提一次→离心取上清液、合并滤液→真空浓缩→脱蛋白（Sevage法）→醇沉→离心，得沉淀→真空干燥，研磨得桃胶多糖粉末→蒸馏水溶解定容至50mL。
1.2.3 桃胶多糖提取率的测定 从稀释的样品提取液中各取出1mL，置于10mL的试管中，依照上述方法处理，于波长490nm处测定吸光度。按照以下公式[4]计算桃胶粗多糖的提取率（%）。
桃胶粗多糖提取率（%）=C0VK×10-4/W×100
式中：C0-测量液多糖的浓度（μg/mL）；V-粗提取液体积（m L）；K-稀释倍数；W-原料干重（g）。
1.2.4 单因素实验
1.2.4.1 水料比的选择 称取桃胶8份，各5g，于500m L锥形瓶中。以蒸馏水为提取剂分别设置水料比20∶1、30∶1、40∶1、50∶1、60∶1、70∶1（ml/g），置于60℃水浴锅中加热1h后，500W微波处理8min，提取两次，研究料液比对桃胶多糖提取率的影响。
1.2.4.2 微波功率的选择 称取桃胶5份，各5g，于500m L锥形瓶中。以蒸馏水为提取剂，水料比为50∶1，置于60℃水浴锅中加热1h后，微波处理8min，提取两次，研究不同微波功率200、300、400、500、600、700W对桃胶多糖提取率的影响。
1.2.4.3 微波处理时间的选择 称取桃胶5份，各5g，于500m L锥形瓶中。以蒸馏水为提取剂，水料比为50∶1，置于60℃水浴锅中加热1h后，微波功率为500W，研究微波处理时间6、8、10、12、14、16min对桃胶糖提取率的影响。
1.2.5 正交实验 为了确定料液比、微波功率、微波处理时间三个因素共同作用对桃胶多糖提取率的影响，在单因素实验的基础上，采用L9（33）正交表对以上三个因素进行正交实验。
2 结果与分析
2.1 单因素实验
2.1.1 料液比对桃胶多糖提取率的影响 在一定范围内，桃胶多糖提取率随着溶液量的增加而增加，当水料比达到60∶1（ml/g）时多糖提取率达到最大，为69.6%。当溶液量继续增加，多糖提取率反而下降。其原因可能是随着水料比的增加，浸提掖的量太大会影响后续的浓缩，综合考虑，水料比60∶1为佳。
2.1.2 微波功率对桃胶多糖提取率的影响 随着微波功率的增大，桃胶多糖提取率先上升后有所下降。当微波功率为600W时，桃胶多糖提取率达到最大为68.5%。其主要原因是微波功率过高产热会造成溶剂的挥发甚至暴沸，增加溶剂的损失，多糖的结构也可能被破坏[5]，造成桃胶多糖提取率有下降的趋势。因此，选择微波功率为600W。
2.1.3 微波处理时间对桃胶多糖提取率的影响 随着微波处理时间的增加，桃胶细胞的结构破坏程度增大，因此多糖提取率提高[6]；在12min以后，多糖提取率又有所下降。微波时间过长，导致多糖在微波过程中分解，纯度降低。因此综合考虑，微波处理时间为12min时最佳，桃胶多糖提取率达到最大为69.9%。
2.2 微波辅助法提取桃胶多糖的正交优化结果
以水料比（50：1、60：1、70：1ml/g）、微波功率（500、600、700W）、微波处理时间（10、12、14min）设计三因素三水平的正交实验，结果为：影响桃胶多糖提取率的几个因素顺序为：微波功率>水料比>微波处理时间。桃胶多糖的最佳提取工艺为水料比60∶1（ml/g）、微波功率为600W、微波处理时间14min。按照最佳提取工艺条件组合，重复三次，进行验证性实验，所得桃胶多糖的提取率分别为75.5%、74.9%、74.8%。故最佳提取工艺条件下，桃胶多糖提取率为74.7%。
3 结论
本实验采用微波辅助法提取桃胶中的多糖，以桃胶多糖提取率为指标，研究了料液比、微波功率、微波处理时间三个因素共同作用对桃胶多糖提取率的影响，并利用正交实验优化了桃胶多糖的最佳提取工艺条件。经过优化得到的桃胶多糖最佳提取条件为：水料比60∶1（ml/g）、微波功率为600W、微波处理时间14min，其中微波功率对桃胶多糖的提取率影响最大。在此最优提取条件下，桃胶多糖的提取率为74.7%。微波辅助提取法在提高桃胶多糖提取率、节省时间等方面体现出了明显的优势。旨在为桃胶多糖的提取方法提供参考，同时为进一步充分利用桃胶这种资源提供很好的理论依据。
参考文献：
[1]张卫明，肖正春，史劲松.中国植物胶资源开发研究与利用[M].南京：东南大学出版社，2008：107-110.
[2]陈旋，张翼，张剑波.植物多糖的研究进展[J].中国新药杂志，2007，16（13）：1000-1005.
[3]陈钧辉，李俊，张太平，等.生物化学实验[M].科学出版社，2008，15.
[4]石奇，石异，杨晓慧，等.微波法提取大枣多糖的工艺研究[J].应用科技，2008，35（7）：55-57.
[5]田成，程超.鴨跖草水溶性多糖的微波辅助提取[J].食品研究与开发，2007，28（8）：98-100.
[6]王敏，赵倩.微波辅助提取双糖饮中多糖的工艺研究[J].中国药房，2007，18（36）：2828-2829.
作者简介：
李蕾（1976.2），女，云南昭通人，讲师，硕士，主要从事食品加工与安全研究；文山学院化学与工程学院。
关键词：桃胶，多糖，微波提取
桃胶是树木在受创部位渗出的黏性液体，暴露于空气中经风干后形成玻璃状的透明物质，一般呈深褐色或淡黄色。桃胶是由复杂的多糖类成分所组成[1]。植物多糖是中草药的重要活性成分，并具有多种生物活性和保健功能[2]，传统植物多糖提取多选择水提醇沉法，但桃胶胶质水溶后粘度较大，多糖难以扩散出来，传统方法提取的多糖提取率低。目前，对桃胶多糖提取还鲜见采用微波辅助提取的研究报道。故本实验利用微波辅助法提取桃胶多糖，在料液比、微波功率、微波处理时间三个单因素实验的基础上，通过正交实验确定桃胶多糖的最佳提取工艺条件，旨在为桃胶多糖的提取提供参考，也为进一步研究其生物学活性及产业化开发提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
桃胶 购于文山市三七市场；其余试剂均为国产分析纯。
UV—1200S 紫外可见分光光度计，上海翱艺仪器有限公司；YP2002 电子分析天平，上海佑科仪器仪表有限公司；R206B旋转蒸发器 上海申生科技有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 葡萄糖标准曲线的绘制[3]依据陈钧辉等《生物化学实验》制得葡萄糖标准曲线。其线性回归方程为y=0.0073x-0.0188，R2=0.9993。
1.2.2 桃胶多糖提取工艺流程 原桃胶→去杂→冷冻干燥→粉碎、过筛（80目）→准确称取5g →蒸馏水浸泡1h，微波提取两次→离心取上清液、滤渣重复浸提一次→离心取上清液、合并滤液→真空浓缩→脱蛋白（Sevage法）→醇沉→离心，得沉淀→真空干燥，研磨得桃胶多糖粉末→蒸馏水溶解定容至50mL。
1.2.3 桃胶多糖提取率的测定 从稀释的样品提取液中各取出1mL，置于10mL的试管中，依照上述方法处理，于波长490nm处测定吸光度。按照以下公式[4]计算桃胶粗多糖的提取率（%）。
桃胶粗多糖提取率（%）=C0VK×10-4/W×100
式中：C0-测量液多糖的浓度（μg/mL）；V-粗提取液体积（m L）；K-稀释倍数；W-原料干重（g）。
1.2.4 单因素实验
1.2.4.1 水料比的选择 称取桃胶8份，各5g，于500m L锥形瓶中。以蒸馏水为提取剂分别设置水料比20∶1、30∶1、40∶1、50∶1、60∶1、70∶1（ml/g），置于60℃水浴锅中加热1h后，500W微波处理8min，提取两次，研究料液比对桃胶多糖提取率的影响。
1.2.4.2 微波功率的选择 称取桃胶5份，各5g，于500m L锥形瓶中。以蒸馏水为提取剂，水料比为50∶1，置于60℃水浴锅中加热1h后，微波处理8min，提取两次，研究不同微波功率200、300、400、500、600、700W对桃胶多糖提取率的影响。
1.2.4.3 微波处理时间的选择 称取桃胶5份，各5g，于500m L锥形瓶中。以蒸馏水为提取剂，水料比为50∶1，置于60℃水浴锅中加热1h后，微波功率为500W，研究微波处理时间6、8、10、12、14、16min对桃胶糖提取率的影响。
1.2.5 正交实验 为了确定料液比、微波功率、微波处理时间三个因素共同作用对桃胶多糖提取率的影响，在单因素实验的基础上，采用L9（33）正交表对以上三个因素进行正交实验。
2 结果与分析
2.1 单因素实验
2.1.1 料液比对桃胶多糖提取率的影响 在一定范围内，桃胶多糖提取率随着溶液量的增加而增加，当水料比达到60∶1（ml/g）时多糖提取率达到最大，为69.6%。当溶液量继续增加，多糖提取率反而下降。其原因可能是随着水料比的增加，浸提掖的量太大会影响后续的浓缩，综合考虑，水料比60∶1为佳。
2.1.2 微波功率对桃胶多糖提取率的影响 随着微波功率的增大，桃胶多糖提取率先上升后有所下降。当微波功率为600W时，桃胶多糖提取率达到最大为68.5%。其主要原因是微波功率过高产热会造成溶剂的挥发甚至暴沸，增加溶剂的损失，多糖的结构也可能被破坏[5]，造成桃胶多糖提取率有下降的趋势。因此，选择微波功率为600W。
2.1.3 微波处理时间对桃胶多糖提取率的影响 随着微波处理时间的增加，桃胶细胞的结构破坏程度增大，因此多糖提取率提高[6]；在12min以后，多糖提取率又有所下降。微波时间过长，导致多糖在微波过程中分解，纯度降低。因此综合考虑，微波处理时间为12min时最佳，桃胶多糖提取率达到最大为69.9%。
2.2 微波辅助法提取桃胶多糖的正交优化结果
以水料比（50：1、60：1、70：1ml/g）、微波功率（500、600、700W）、微波处理时间（10、12、14min）设计三因素三水平的正交实验，结果为：影响桃胶多糖提取率的几个因素顺序为：微波功率>水料比>微波处理时间。桃胶多糖的最佳提取工艺为水料比60∶1（ml/g）、微波功率为600W、微波处理时间14min。按照最佳提取工艺条件组合，重复三次，进行验证性实验，所得桃胶多糖的提取率分别为75.5%、74.9%、74.8%。故最佳提取工艺条件下，桃胶多糖提取率为74.7%。
3 结论
本实验采用微波辅助法提取桃胶中的多糖，以桃胶多糖提取率为指标，研究了料液比、微波功率、微波处理时间三个因素共同作用对桃胶多糖提取率的影响，并利用正交实验优化了桃胶多糖的最佳提取工艺条件。经过优化得到的桃胶多糖最佳提取条件为：水料比60∶1（ml/g）、微波功率为600W、微波处理时间14min，其中微波功率对桃胶多糖的提取率影响最大。在此最优提取条件下，桃胶多糖的提取率为74.7%。微波辅助提取法在提高桃胶多糖提取率、节省时间等方面体现出了明显的优势。旨在为桃胶多糖的提取方法提供参考，同时为进一步充分利用桃胶这种资源提供很好的理论依据。
参考文献：
[1]张卫明，肖正春，史劲松.中国植物胶资源开发研究与利用[M].南京：东南大学出版社，2008：107-110.
[2]陈旋，张翼，张剑波.植物多糖的研究进展[J].中国新药杂志，2007，16（13）：1000-1005.
[3]陈钧辉，李俊，张太平，等.生物化学实验[M].科学出版社，2008，15.
[4]石奇，石异，杨晓慧，等.微波法提取大枣多糖的工艺研究[J].应用科技，2008，35（7）：55-57.
[5]田成，程超.鴨跖草水溶性多糖的微波辅助提取[J].食品研究与开发，2007，28（8）：98-100.
[6]王敏，赵倩.微波辅助提取双糖饮中多糖的工艺研究[J].中国药房，2007，18（36）：2828-2829.
作者简介：
李蕾（1976.2），女，云南昭通人，讲师，硕士，主要从事食品加工与安全研究；文山学院化学与工程学院。