【摘 要】
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目的分别检测miR－140－5p(微小RNA－140－5p)和ADAM10 (去整合素金属蛋白酶10)在下咽癌组织中的表达，并探讨miR－140－5p对下咽癌FaDu细胞迁移和侵袭能力的影响及可能的调控机制。方法应用real－time PCR(荧光定量PCR)检测miR－140－5p及ADAM10 mRNA在33例下咽癌患者肿瘤组织和癌旁组织中的表达；利用转染技术分别上调miR－140－5p、下调
【机 构】
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250021 济南，山东大学附属省立医院耳鼻咽喉头颈外科,250021 济南，山东大学附属省立医院耳鼻咽喉头颈外科,250021 济南，山东大学附属省立医院耳鼻咽喉头颈外科,
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目的分别检测miR－140－5p(微小RNA－140－5p)和ADAM10 (去整合素金属蛋白酶10)在下咽癌组织中的表达，并探讨miR－140－5p对下咽癌FaDu细胞迁移和侵袭能力的影响及可能的调控机制。
方法应用real－time PCR(荧光定量PCR)检测miR－140－5p及ADAM10 mRNA在33例下咽癌患者肿瘤组织和癌旁组织中的表达；利用转染技术分别上调miR－140－5p、下调miR－140－5p和下调ADAM10的表达；采用transwell迁移和侵袭实验检测miR－140－5p上调、miR－140－5p下调和ADAM10下调对FaDu细胞迁移和侵袭能力的影响；采用Western blot技术检测33对临床标本和FaDu细胞ADAM10蛋白的表达。
结果MiR－140－5p在下咽癌肿瘤组织中明显下调(t＝－4.016，P<0.01)，ADAM10 mRNNA及蛋白在下咽癌肿瘤组织中明显上调(t＝3.960，P<0.01；t＝12.089, P<0.01)。实验组FaDu细胞干扰ADAM10表达后，ADAM10在mRNA和蛋白水平较siRNA－NC阴性对照组明显下调(t＝8.653, P<0.05；t＝5.191, P<0.05)。空白对照组和阴性对照组差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell迁移和侵袭实验显示，hsa－mir－140－5p实验组细胞迁移和侵袭细胞数明显低于hsa－mir－NC阴性对照组(t＝3.255, P<0.05；t＝2.942, P<0.05), anti－mir－140－5p实验组细胞迁移和侵袭细胞数明显高于对照组(t＝－13.521, P<0.05; t＝－6.223, P<0.05)，si－ADAM10实验组细胞迁移和侵袭细胞数明显低于对照组(t＝4.759, P<0.05；t＝3.663, P<0.05)。ADAM10下调能够部分逆转miR－140－5p下调对细胞迁移和侵袭能力的促进作用。Western blot显示，hsa－mir－140－5p实验组ADAM10蛋白的表达量较对照组明显降低，Anti－mir－140－5p实验组ADAM10蛋白较对照组明显升高。
结论miR－140－5p在下咽癌肿瘤组织中低表达且与下咽癌患者的肿瘤T分期及淋巴结转移N分期显著相关，且ADAM10在肿瘤组织中高表达。MiR－140－5p能够调控ADAM10的表达，miR－140－5p抑制下咽癌细胞迁移和侵袭能力，可能是通过下调ADAM10蛋白实现的。MiR－140－5p可能成为下咽癌治疗的新靶点。
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