【摘 要】
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目的 观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular endothelial cell,RPMVEC)小窝蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)表达的影响.方法 体外培养RPMVEC,分别采用RT-PCR、原位杂交及免疫荧光检测Cav-1 mRNA及蛋白的表达,原位杂交检测LPS和蛋白激酶C(PKC)抑
【机 构】
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目的 观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular endothelial cell,RPMVEC)小窝蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)表达的影响.方法 体外培养RPMVEC,分别采用RT-PCR、原位杂交及免疫荧光检测Cav-1 mRNA及蛋白的表达,原位杂交检测LPS和蛋白激酶C(PKC)抑制剂双吲哚基顺丁烯二酰亚胺(bis-indolylmaleimide,BIM)对Cav-1 mRNA表达的影响.结果 RT-PCR和原位杂交同步检测出RPMVEC表达Cav-1基因；免疫荧光检测出RPMVEC表达Cav-1蛋白；LPS以浓度依赖方式诱导Car-1 mRNA表达增加:0.1、1、10 mg/L LPS分别孵育RPMVEC 6 h后,Cav-1 mRNA表达量随其浓度增加逐渐升高,与正常组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);10mg/LLPS刺激RPMVEC不同时间(1h、2h、3h、6 h)后,RPMVEC中Cav-1 mRNA表达水平呈动态变化:1 h开始上升,2h达峰值,之后逐渐下降,但至6h仍高于正常水平(P＜0.05)；10 μmol/L BIM预孵育RPMVEC 1 h后,可显著下调10 mg/L LPS对Cav-1 mRNA表达的诱导效应(P＜0.05).结论 RPMVEC表达Cav-1,LPS上调RPMVEC Cav-1基因转录,PKC信号通路参与LPS对RPMVEC Cav-1基因转录的调控。
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