目的建立并优化CFSE标记结合流式细胞术检测人NK细胞分裂、增殖和杀伤功能的方法。方法利用CFSE标记磁珠纯化的人NK细胞,加或不加IL-2进行培养。分别在第3、5、7天收集细胞,流式细胞术对NK细胞的分裂增殖进行检测;利用IL-2活化NK细胞作为效应细胞,与靶细胞（K562细胞）按不同效靶比在37℃5%CO₂培养箱共孵育4 h加入碘化丙啶（PI）,流式细胞术检测CFSE⁺PI⁺K562细胞（死亡的靶细胞）的百分率。结果CFSE标记的NK细胞在IL-2的作用下第5天即可观察到细胞增殖,至第7天80%以上的NK细胞均发生增殖,分裂1～6次。在对NK细胞杀伤功能的研究中,发现IL-2刺激后NK细胞的杀伤功显著增强。此外,当IL-2或IL-12活化的NK细胞作用于不同的靶细胞时,均可有效地杀伤靶细胞。结论以CFSE标记技术结合流式细胞术可在单细胞水平客观精确地对NK细胞的增殖、分裂和杀伤功能进行分析。本方法灵敏度高、操作简便易行、重复性好,对其他淋巴细胞亚群功能的研究具有重要的借鉴意义。