严重烧伤大鼠骨骼肌成肌细胞增殖活性检测及蛋白激酶B表达分析

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目的 分析严重烧伤后大鼠骨骼肌成肌细胞增殖活性变化和蛋白激酶B(Akt)及磷酸化Akt(pAkt)表达水平,探讨烧伤后骨骼肌萎缩的机制.方法 雄性Wistar大鼠120只随机分为烧伤组和对照组,每组60只.烧伤组根据文献[1]的方法建立40%Ⅲ°烫伤(以下简称烧伤)模型.烧伤后立即腹腔注射生理盐水40 ml/kg进行复苏,创面外用碘伏.对照组除浸入37℃温水外,其余程序均与烧伤组相同.每组每个时间点10只大鼠,于伤后第0、1、4、7、10、14天取其胫骨前肌并称重.采用免疫组织化学双标法检测烧伤后骨骼肌增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况以反映成肌细胞增殖活性.用Western Blot检测总Akt及pAkt表达水平并进行分析.结果 严重烧伤后大鼠胫骨前肌重量显著下降,于伤后第4天达到最低(P<0.01).骨骼肌成肌细胞增殖活性于伤后第1天即显著下降(P<0.01),第7天后逐渐升高至对照水平.骨骼肌总Akt表达水平伤后无显著变化(P>0.05).其活性形式pAkt表达在伤后第4天前两组均几乎检测不到,而烧伤第7天后显著升高(P<0.01).结论 严重烧伤后早期骨骼肌萎缩明显,成肌细胞增殖活性下降是其原因之一.磷酸化Akt在烧伤早期促成肌细胞增殖作用减弱,创面修复期则显著增强,可部分解释成肌细胞增殖活性的变化。

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