【摘 要】
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目的对现有的RNA样本质量控制的方法进行方法学验证。方法RNA样本质量控制往往关注浓度、纯度和完整度3个参数,其中前两者可以用光密度(optical density,OD)260和OD260/280来
【机 构】
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上海医药临床研究中心,上海申康医院发展中心
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目的对现有的RNA样本质量控制的方法进行方法学验证。方法RNA样本质量控制往往关注浓度、纯度和完整度3个参数,其中前两者可以用光密度(optical density,OD)260和OD260/280来表征,后者可以用RNA完整度(RNA integrity number,RIN)值来衡量。由于OD260/280对于RNA纯度的评价尚无明确标准,故仅对RNA的浓度和完整度展开探讨。按照ISO/IEC 17025:2005的要求,从精密度、准确度和线性3个方面,对RNA定量进行方法学验证。由于缺乏测量RIN值测定的标准品,RNA完整度的方法学验证仅限于精密度的考察。结果选用的微量紫外分光光度法对RNA标准品进行定量,精密度、准确度和线性均达到要求;Agilent 2100的RIN值系统对人Hela细胞来源的总RNA进行了评价,RIN值的精密度也通过了考察。结论微量紫外分光光度法和Agilent 2100的RIN值系统可以作为RNA样本质量控制的方法。
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