论文部分内容阅读
目的
建立人红细胞膜胆固醇高效液相色谱测定方法。
方法实验方法学研究。选择2012年9月至2013年2月间因胸闷、胸痛在南京军区南京总医院住院并行选择性冠状动脉造影患者167例分为3组：稳定性心绞痛（SAP）组76例、急性冠状动脉综合征（ACS）组46例和对照（Control）组45例。采集红细胞样品经溶血和洗涤后，在70 ℃氢氧化钾溶液中皂化反应。样品经正己烷-异丙醇混合溶剂提取后，以Lichrospher色谱柱为固定相，乙腈~异丙醇为流动相进行色谱等度分离，208 nm波长下定量检测。检测3组研究对象的红细胞膜胆固醇水平。多组间均数比较用One-way ANOVA检验；相关性比较采用Spearman相关性分析。
结果在所建立的分析条件下，胆固醇色谱保留时间约为6.1 min，峰形清晰对称，与样品中其余内源性物质分离完全，定量准确。胆固醇进样量在（0.05～2.00） μg范围与峰面积呈良好线性关系，对红细胞膜标本检测结果与胆固醇酶法检测试剂盒测定值相关良好。Control组、SAP组以及ACS组红细胞膜胆固醇水平分别为：（87.0 μg/mg，75.4~98.9 μg/mg）、（92.9 μg/mg，83.8~109.0 μg/mg）和（173.9 μg/mg，140.0~188.8 μg/mg）。统计学分析显示，ACS组与Control组和SAP组相比，CEM水平明显增高，差异均有统计学意义（t值分别为-14.44和-14.68，P均<0.01）；SAP组与Control组相比，CEM水平有增高，但差异无统计学意义（t=-1.88，P>0.05）。
结论成功建立了一种检测红细胞膜总胆固醇含量的方法。灵敏度高、特异、重复性较好。（中华检验医学杂志，2014,37：179-183）