【摘 要】
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L-色氨酸代谢合成中,增加芳香族氨基酸前体物质的供应是提高产量的关键因素之一.本研究在Escherichia coli KT1306中过表达碳贮存调控中心(Carbon storage regulator,CSR)中
【机 构】
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江南大学糖化学与生物技术教育部重点实验室; 江南大学工业生物工程学院生物技术教育部重点实验室工业微生物研究中心; 江南大学化学与材料工程学院;
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA021201)资助~~
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L-色氨酸代谢合成中,增加芳香族氨基酸前体物质的供应是提高产量的关键因素之一.本研究在Escherichia coli KT1306中过表达碳贮存调控中心(Carbon storage regulator,CSR)中的非编码小RNA csrB和转酮醇酶基因tktA,分别来增加芳香族氨基酸合成前体磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)及赤藓糖-4-磷酸(E4P)的供应.结果显示,2%的葡萄糖浓度下,过表达csr B及tkt A单基因分别使工程菌L-色氨酸产量提高7.5%和15.6%,csr B-tkt A双基因共表达使工程菌的产量提高24.7%.在低于3%的葡萄糖浓度下,重组菌株单位碳源的L-色氨酸产率均有提高,且csrB-tktA共表达的效果最佳,碳源越少,E.coli KT1306/p RSF-tac-csr B-tac-tkt A产酸率优势越明显;当葡萄糖浓度为0.1%时,csr B-tkt A共表达菌株的L-色氨酸产率达0.21g g-1,接近于大肠杆菌非生长状态下的最大理论产值.本研究结果表明,csr B与tkt A的组合能够增加芳香族氨基酸前体物质的供应,使更多碳流流向芳香族途径,对于提升大肠杆菌生物合成L-色氨酸的生产性能有明显的促进作用.图7表3参21
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