【摘 要】
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研究酶法合成叔亮氨酸的反应条件.利用产亮氨酸脱氢酶基因工程菌和产甲酸脱氢酶基因工程菌进行混合全细胞生物转化反应合成叔亮氨酸,考察了诱导剂IPTG浓度、诱导温度和诱导时
【机 构】
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中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009
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研究酶法合成叔亮氨酸的反应条件.利用产亮氨酸脱氢酶基因工程菌和产甲酸脱氢酶基因工程菌进行混合全细胞生物转化反应合成叔亮氨酸,考察了诱导剂IPTG浓度、诱导温度和诱导时间等不同诱导条件对产亮氨酸脱氢酶基因工程菌和产甲酸脱氢酶基因工程菌产酶比活力的影响,确定了两种基因工程菌优化的诱导表达条件;通过单因子试验(如转化pH值、转化温度、底物浓度和菌体浓度等)来研究不同反应条件对基因工程菌催化合成叔亮氨酸的影响.结果:工程菌催化合成叔亮氨酸的最适pH是9.5,适合的反应温度为30℃,且两种重组菌的反应湿重比为2∶1时,可达到最高的产量.较高的底物浓度会对反应产生抑制作用,适当提高菌体浓度可以降低底物的抑制作用.通过采用底物分批流加的添加方法,得到了更好的转化效果,最后可达到叔亮氨酸产量为42 mg/ml.
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