【摘 要】
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目的:探索表皮生长因子(EGF)的制备及纯化方法.方法:取小鼠颌下腺约10 g,匀浆,离心取上清.盐析,离心收集沉淀.沉淀溶解于匀浆缓冲液中,上CM-纤维素柱.用不同盐浓度的缓冲液阶
【机 构】
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214063,无锡,江南学院医学系生化室
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目的:探索表皮生长因子(EGF)的制备及纯化方法.方法:取小鼠颌下腺约10 g,匀浆,离心取上清.盐析,离心收集沉淀.沉淀溶解于匀浆缓冲液中,上CM-纤维素柱.用不同盐浓度的缓冲液阶段洗脱,收集得A、B、C、D四个洗脱峰.用MTT法检测各峰EGF活性,用活性峰透析、浓缩,通过Sephadex G 50柱.收集活性峰,浓缩,用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,真空冷冻干燥,得成品.结果:小鼠颌下腺经匀浆,盐析,CM-纤维素柱及Sephadex G 50柱,得具EGF活性、电泳为单一条带的蛋白质,其分子量约6 000.得率为1.44 mg.结论:用盐析及层析法制备、纯化EGF,不失为一简易可行的方法.
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