【摘 要】
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以热带假丝酵母（Candida tropicalis）1798中的ctfat1p基因为研究对象,利用重叠PCR将ctfat1p基因内约500 bp片段与G418抗性基因（kanr）相连接,经末端单酶切后电转化至C.tropicalis
【机 构】
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齐鲁工业大学生物工程学院山东省微生物工程重点实验室
【基金项目】
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山东省自主创新及成果转化专项(No.201422CX02602)
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以热带假丝酵母（Candida tropicalis）1798中的ctfat1p基因为研究对象,利用重叠PCR将ctfat1p基因内约500 bp片段与G418抗性基因（kanr）相连接,经末端单酶切后电转化至C.tropicalis 1798感受态细胞中,通过一次同源单交换,将抗性基因kanr插入至ctfat1p基因内部,实现目的基因的敲除,并通过发酵实验分析Ctfat1p在热带假丝酵母脂肪酸跨膜转运过程中的功能。结果表明,经过G418抗性筛选和基因组PCR鉴定,成功获得ctfat1p基因缺失菌株C.t
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