自组装修饰在不同细胞系中对聚酰胺-胺介导的基因递送的影响

来源 :中国新药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:feit0679
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:通过自组装方法使用蛋白质分子修饰聚酰胺-胺树状大分子(PAMAM)与DNA形成的转染复合物,并考察其性质。方法:使用人血白蛋白(HSA)和表皮生长因子(EGF)修饰PAMAM-DNA转染复合物,测定复合物粒径及Zeta电位;通过DNA固缩程度测定试验和DNaseI消化试验考察修饰后复合物的稳定性;HEK 293T细胞与MCF-7细胞转染质粒,测定其荧光素酶表达水平;MTT检测修饰后复合物对细胞毒性的变化。结果:自组装修饰后的复合物的粒径无显著变化,Zeta电位显著降低,性质稳定;HSA修饰可显著提高复合物在HEK 293T和MCF-7细胞中的转染效率,EGF修饰仅显著提高复合物在MCF-7细胞中的转染效率;两种修饰都能降低PAMAM-DNA复合物对细胞的毒性。结论:自组装修饰方法快速、简便、有效,不影响PAMAM-DNA复合物的稳定性,并且能够实现提高转染效率、靶向递送、降低毒性等目的。 OBJECTIVE: To characterize the transfection complex of polyamide-amine dendrimer (PAMAM) and DNA by protein assembly using self-assembly method. Methods: The PAMAM-DNA transfection complex was modified with human serum albumin (HSA) and epidermal growth factor (EGF), and the particle size and Zeta potential of the complex were measured. The degree of DNA zeta potential HEK 293T cells and MCF-7 cells were transfected with plasmids to determine the luciferase expression level. MTT was used to detect the cytotoxicity of the modified complexes. Results: There was no significant change in the size of the composite after self-assembly, and the Zeta potential was significantly decreased. The HSA modified transfection efficiency of HEK 293T and MCF-7 cells was significantly increased The transfection efficiency of the complex in MCF-7 cells; both modifications reduce the cytotoxicity of the PAMAM-DNA complex. Conclusion: The self-assembly modification method is rapid, simple and effective, does not affect the stability of PAMAM-DNA complex, and can achieve the purpose of improving transfection efficiency, targeted delivery, reduce toxicity and so on.
其他文献
简单介绍了等离子点火装置的工作原理和系统组成,从运行方式、运行控制参数等方面介绍了在菏泽电厂5号机组中的使用情况,并对采用该装置后产生的效益进行了分析,对其它工程的
一、准政策性贷款的基本情况准政策性贷款是指粮棉油市场化改革以来,为确保粮棉油收购顺利进行,不出现区域性“卖粮(棉)难”问题,农发行支持企业自主购销粮棉油的贷款。截至2
目的:观察金丝桃苷对大鼠的长期毒性反应,评价金丝桃苷的安全性,为临床剂量的拟定提供依据。方法:健康Wistar大鼠160只,雌雄各半。按体重随机分为对照组和低、中、高(30,175,
C4KISR系统是美军在C4ISR的基础上提出的创新概念.本文对美军C4KISR系统的组成要素、基本功能以及体系结构框架进行了介绍.在此基础上,重点分析了美军C4KISR系统的
会议
布比卡因是临床常用的长效酰胺类局部麻醉药,大剂量的布比卡因快速入血容易引起室性心律失常甚至心跳骤停,临床常规的复苏治疗成功率低.而临床作为静脉营养物质的脂肪乳剂却
目的:比较不同剂量的帕利哌酮缓释片治疗精神分裂症的疗效和安全性。方法:将80例精神分裂症患者随机分成4组,分别给予帕利哌酮缓释片3,6,9和12 mg口服治疗8周,在治疗前及治疗
目的:建立HPLC-MS/MS法测定血浆中多奈哌齐及其代谢物6-O-去甲基多奈哌齐浓度。方法:采用HPLC-MS/MS法,加入内标后,样品用二氯甲烷为萃取剂提取后进样,以Shisheido C18(100 m
本文作者把在"驾驶台资源管理"培训学习中所学到的先进的管理理念进行了,探讨了如何把这些先进理念带到平时的工作中去。本文我主要从以下四个方面谈谈学习体会:1.用知识来管
多输入多输出(MIMO)技术可以大幅度提高系统的频谱利用率,提供空间分集增益提高传输可靠性.在实际使用过程中,产生了多种空时编码技术.分层空时码(Layered Space-Time Codes,
目的:建立以高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测法测定人血浆中米屈肼浓度的方法,并研究其在健康人体内的药代动力学。方法:以对乙酰氨基酚为内标,血浆样品经甲醇蛋白沉淀后