【摘 要】
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目的:基于PI3K/AKT信号通路探讨双氢青蒿素(DHA)对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响.方法:①不同浓度(25、50、100 μmol/L) DHA干预不同时间(12、24、48、72 h)后,MTT法检测细胞增殖.②不同浓度(0、30、60、90 μmol/L) DHA干预48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡.③划痕实验观察60 μmol/L DHA干预0、6、12、24h后对细胞迁移能力的影响.④60 μmol/L DHA
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目的:基于PI3K/AKT信号通路探讨双氢青蒿素(DHA)对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响.方法:①不同浓度(25、50、100 μmol/L) DHA干预不同时间(12、24、48、72 h)后,MTT法检测细胞增殖.②不同浓度(0、30、60、90 μmol/L) DHA干预48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡.③划痕实验观察60 μmol/L DHA干预0、6、12、24h后对细胞迁移能力的影响.④60 μmol/L DHA干预12h后,PCR检测细胞内凋亡相关因子Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax的mRNA表达水平.60 μmol/L DHA干预48 h后,Western blot检测细胞内Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax以及PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的蛋白表达水平.结果:①DHA能够抑制MDA-MB-231细胞增殖,且抑制作用随药物浓度增加而增强.②DHA可以促进MDA-MB-231细胞凋亡,且随着药物浓度增加,促凋亡作用增强.③30 μmol/L DHA作用可使细胞周期阻滞在G0/G1期;60、90 μmol/L DHA作用后细胞周期阻滞在G2/M期.④60 μmol/L DHA干预12、24h后,细胞迁移率显著降低(P＜0.01).⑤60 μmol/L DHA干预后,Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达水平以及Bax/Bcl-2 mRNA表达比值显著上调(P＜0.01),cleaved Caspase-9/Caspase-9、Bax/Bcl-2蛋白表达比值显著升高(P＜0.05);同时PI3K蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),而p-PI3K、p-AKT的蛋白表达水平显著降低(P＜0.01).结论:DHA可能通过抑制PI3K/AKT信号通路,抑制MDA-MB-231细胞的增殖和迁移,并诱导细胞凋亡.
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