表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析

来源 :动物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：pipijiayoua

【摘要】

：

利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3+vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上.采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞.在光学

【作者】

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李嘉琦吴娟孙茂盛戴长柏

【机构】

：

中国医学科学院协和医科大学医学生物学研究所,中国医学科学院协和医科大学医学生物学研究所

【出处】

：

动物医学进展

【发表日期】

：

2003年2期

【关键词】

：

重组腺病毒 HAV结构基因鉴定细胞病变甲型肝炎病毒基因工程病毒疫苗转移载体 recombinant adenovirus structural ge

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利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3+vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上.采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞.在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒.以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0 TCID50/mL.

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