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泛素—核糖体蛋白S27a基因的克隆、测序及其原核GST融合表达和纯化

来源 :赣南医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yuanbowen

【摘 要】

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目的:克隆泛素-核糖体蛋白S27a基因并在大肠杆菌细胞内高效表达,并纯化该蛋白.方法:从HL-60细胞中提取总RNA,通过RT-PCR扩增获得泛素/核糖体蛋白S27a的编码区cDNA,将Hind Ⅲ/

【作 者】

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曾雪英  黄功华 

【机 构】

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赣南医学院,中山大学生命科学学院

【出 处】

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赣南医学院学报

【发表日期】

：

2005年5期

【关键词】

：

泛素—核糖体蛋白S27a 基因的克隆 基因测序 GST融合表达 蛋白纯化 ubiquitin- ribosomal protein S27a  gene clo 

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目的:克隆泛素-核糖体蛋白S27a基因并在大肠杆菌细胞内高效表达,并纯化该蛋白.方法:从HL-60细胞中提取总RNA,通过RT-PCR扩增获得泛素/核糖体蛋白S27a的编码区cDNA,将Hind Ⅲ/NdeⅠ双酶切的PCR产物连接到同样双酶切的GST融合表达载体pGEXGST构建为融合表达质粒pGEXGST-S27a,转化感受态的大肠杆菌JM109实现质粒的扩增与纯化,经DNA测序确证后再转化感受态表达菌BL21,表达并纯化出融合蛋白.结果: (1) PCR 扩增获得长约560bp 的泛素-核糖体蛋白S2

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