番茄果实特异性LYC-B干扰载体的构建及在不同颜色果实中的表达特异性验证

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为了研究番茄LYC-B干扰对类胡萝卜素合成主要酶和主要代谢产物的影响,构建了果实特异性的番茄红素β-环化酶LYC-B干扰载体,并验证了其在不同颜色番茄果实中的有效性。依据X13437.1扩增番茄果实特异启动子E8,构建了果实特异性载体E8-pBI121,其在粉色、红色、绿色和紫色的番茄果实中均能表达。依据X86452.1扩增番茄LYC-B从61~861bp间长度为801bp的片段LYC-B1和从480~781bp间长度为302bp的片段LYC-B2,构建了以CaMV35S为启动子的LYC-B干扰表达载体pBI121-B1B2,以E8替换CaMV35S,构建了果实特异性干扰载体E8-pBI121-B1B2。采用农杆菌注射法分别侵染番茄叶片和果实,GUS染色显示,pBI121-B1B2在叶片、果实和种子中均表达,E8-pBI121-B1B2只在果实和种子中表达。
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