【摘 要】
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目的探讨高糖诱发施万细胞损伤时自噬与核因子E2相关受体2(Nrf2)信号通路的关系。方法将原代细胞株RSC96体外培养制成单细胞原液，分别接种于96孔板(1×104个/ml，200 μl/孔)或6孔板(1×106个/ml，2 ml/孔)，培养48 h。采用随机数字表法分为3组(n＝25)：对照组(C组)、高糖组(H组)和高糖+自噬激动剂雷帕霉素组(H+RAP组)。C组在正常培养基中培养；H组培养基
【机 构】
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天津医科大学第二医院麻醉科 300211;天津医科大学三中心临床学院 天津市第三中心医院麻醉科 天津市肝胆疾病研究所 天津市重症疾病体外生命支持重点实验室 300170,天津医科大学三中心临床学院 天
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目的探讨高糖诱发施万细胞损伤时自噬与核因子E2相关受体2(Nrf2)信号通路的关系。
方法将原代细胞株RSC96体外培养制成单细胞原液，分别接种于96孔板(1×104个/ml，200 μl/孔)或6孔板(1×106个/ml，2 ml/孔)，培养48 h。采用随机数字表法分为3组(n＝25)：对照组(C组)、高糖组(H组)和高糖+自噬激动剂雷帕霉素组(H+RAP组)。C组在正常培养基中培养；H组培养基中加入50 mmol/L葡萄糖；H+RAP组培养基中加入50 mmol/L葡萄糖和5 μmol/L雷帕霉素。孵育48 h时，倒置显微镜下观察细胞生长情况，采用MTT法测定细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，硫代巴比妥酸法测定MDA含量，黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性，Western blot法检测Nrf2、P62和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)的表达水平。
结果与C组比较，H组和H+RAP组细胞活力和SOD活性降低，细胞凋亡率和MDA含量升高，Nrf2、P62和LC3Ⅱ表达上调(P<0.05)；与H组比较，H+RAP组细胞活力和SOD活性升高，细胞凋亡率和MDA含量降低，Nrf2和LC3Ⅱ表达上调，P62表达下调(P<0.05)。
结论自噬水平增强可激活Nrf2信号通路，是高糖诱发施万细胞损伤的内源性保护机制。
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