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作者简介：谢宏峰（1980-），女，硕士，助理研究员，研究方向为植物保护。
通讯作者：迟玉成（1969-），男，博士，副研究员，研究方向为植物保护。
摘要：采用生长速率法研究了蓖麻籽粗提物对花生网斑病菌的抑制作用。结果表明：不同浓度的蓖麻籽粗提物对花生网斑病菌均有不同程度的抑制作用，且随着药剂浓度的增加，抑制率增大；但随着时间的推移，抑制效果逐渐减弱，24、48、96 h的EC50分别为2183、36727和43878 mg/L。
关键词：蓖麻籽；粗提物；花生网斑病；抑制作用
中图分类号：S435.652 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2013）06-0081-03
花生网斑病是花生生产上的一种重要的叶部病害[1]。该病在花生整个生长期均可发生，以花生生长中后期发病最重，主要危害叶片，其次危害叶柄和茎部，一般减产10%～20%，严重的达30%以上[2]。目前，化学防治仍是植物病害最主要的防治措施，但化学药剂存在毒性大、残留高、成本高、污染环境等问题。植物源活性杀菌剂具有分解快、残留低、污染少和毒性小等特点，因此利用植物源活性物质防治植物病害的研究逐渐受到重视并引起广泛关注[3]。
蓖麻（Ricinus communus L） 属大戟科蓖麻属，为双子叶一年生或多年生植物。蓖麻是具有特殊工业用途的油料植物，是集多种开发功能于一体的生物资源，也是一种重要的生物杀虫、抗癌和生物抗污染源[4]。 从蓖麻中提取的蓖麻毒素具有较强的杀虫、杀菌作用，是制造生物农药的重要来源[5]。已有研究表明，蓖麻籽粗提物对黄瓜褐斑病、玉米小斑病病菌有明显的抑制作用[6，7]。 本试验以花生网斑病病菌为研究对象，研究了蓖麻籽粗提物对花生网斑病病菌的生物活性，以期为花生网斑病的生物防治提供依据。1 材料与方法
11 供试材料
蓖麻籽购自青岛市李沧区农贸市场；网斑病病菌（Phoma arachidicola Marasas，Pauer & Boerema）由山东省花生研究所病害与微生物实验室分离、保存。
12 试验方法
121 蓖麻籽粗提物的制备 蓖麻籽粗提物采用索氏提取法抽提[8]。将蓖麻籽置于40～50℃烘箱中恒温干燥，粉碎后过0180～0425 mm孔筛。取50 g粉末，包好，放入提取器中（不超过虹吸管），再加入5倍植物粉末量的95%乙醇，抽提24 h后取出抽滤，旋转浓缩至1 g/ml （干物质量计），装入棕色玻璃瓶中，置4℃冰箱中保存备用。
122 对网斑病菌的生物活性测定 无菌条件下，将PDA培养基与粗提液充分混匀，粗提液浓度分别为50、100、200、300、500 mg/L，制备直径90 mm的固体平板培养基，以不添加粗提液的PDA培养基为对照。网斑病菌培养5天后，用灭菌的打孔器制备菌饼（直径为5 mm），将菌饼接种到固体培养基中央，每皿一块，菌丝面朝下放置，每处理重复3次。置于恒温培养箱内，28℃黑暗条件下培养，分别在24、48、96 h采用十字交叉法测量菌落直径，计算生长抑制率：
由表1可以看出，蓖麻籽粗提物在50～500 mg/L之间，花生网斑病菌均受到不同程度的抑制作用，且随着药剂浓度的增加，抑制率也增加。但随着时间的推移，抑制效果逐渐减小，24、48、96 h的EC50分别为2183、36727、43878 mg/L。3 讨论
随着人们食品安全意识的不断增强和对农产品农药残留问题的关切，利用非化学方法控制病虫害受到植物保护工作者越来越多的重视，开发对有害生物高效、对非靶标生物安全、对环境友好的生物农药己成为新的研究热点[8]。 蓖麻种子、
叶片中含有多种杀菌生物活性物质。本试验结果表明，蓖麻籽粗提物对花生网斑病菌在一定浓度范围内具有不同程度的抑制作用，随着时间的推移，抑制作用逐渐减小。其原因可能是由于非药剂因素随着时间的推移逐渐加强，从而消弱了药剂的作用。另外，抑制细菌生长需要粗提物的浓度较高，可能是由于提取的纯度不够，导致用药量过大。
蓖麻不同组织由于所含活性物质的成分和含量不同[5]，其对病菌的作用效果存在明显的差异。本试验只研究了蓖麻籽粗提物的杀菌作用，要有效利用蓖麻的生物活性物质进行植物病害防治，还需要对蓖麻不同部位活性物质的抑菌效果进行研究，并且对抑菌活性物质进行进一步分离纯化，真正的应用于生产还需做大量研究工作。参 考 文 献：
[1] 樊堂群， 迟玉成， 谢宏峰，等 不同抗性花生感染网斑病菌的酶活性及丙二醛含量变化[J] 花生学报， 2009，38（4）：31-34
[2] 徐秀娟，石延茂，徐明显，等 花生网斑病的发生与防治研究[J] 山东农业科学， 2009，4：29-30
[3] 文艳华， 冯志新， 徐汉虹， 等 植物抽提物对几种植物病原线虫的杀线活性筛[J] 华中农业大学学报， 2001，20（3）：235-238
[4] 黄家祥 蓖麻生产及综合开发利用技术[M] 北京： 中国农业出版社， 2005
[5] 温燕梅， 冯亚非， 郑明珠 蓖麻不同部位杀虫活性成分蓖麻碱的提取及含量[J] 农药， 2008， 47 （8）：584-585
[6] 吴雪平， 田雪亮， 项志锋 蓖麻籽水提物对黄瓜褐斑病菌的生物活性研究[J] 西北农业学报， 2006，15 （6）：215-216
[7] 吴雪平， 邓天福， 项志锋 蓖麻籽水提物对玉米小斑病菌的毒力测定[J] 古林农业科学， 2006，31（4）：43-44， 52
[8] 周福才， 顾爱祥， 周桂生， 等 蓖麻叶片粗提物对黄瓜瓜绢螟的作用[J] 中国生态农业学报， 2012，20（5）：629 -624
通讯作者：迟玉成（1969-），男，博士，副研究员，研究方向为植物保护。
摘要：采用生长速率法研究了蓖麻籽粗提物对花生网斑病菌的抑制作用。结果表明：不同浓度的蓖麻籽粗提物对花生网斑病菌均有不同程度的抑制作用，且随着药剂浓度的增加，抑制率增大；但随着时间的推移，抑制效果逐渐减弱，24、48、96 h的EC50分别为2183、36727和43878 mg/L。
关键词：蓖麻籽；粗提物；花生网斑病；抑制作用
中图分类号：S435.652 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2013）06-0081-03
花生网斑病是花生生产上的一种重要的叶部病害[1]。该病在花生整个生长期均可发生，以花生生长中后期发病最重，主要危害叶片，其次危害叶柄和茎部，一般减产10%～20%，严重的达30%以上[2]。目前，化学防治仍是植物病害最主要的防治措施，但化学药剂存在毒性大、残留高、成本高、污染环境等问题。植物源活性杀菌剂具有分解快、残留低、污染少和毒性小等特点，因此利用植物源活性物质防治植物病害的研究逐渐受到重视并引起广泛关注[3]。
蓖麻（Ricinus communus L） 属大戟科蓖麻属，为双子叶一年生或多年生植物。蓖麻是具有特殊工业用途的油料植物，是集多种开发功能于一体的生物资源，也是一种重要的生物杀虫、抗癌和生物抗污染源[4]。 从蓖麻中提取的蓖麻毒素具有较强的杀虫、杀菌作用，是制造生物农药的重要来源[5]。已有研究表明，蓖麻籽粗提物对黄瓜褐斑病、玉米小斑病病菌有明显的抑制作用[6，7]。 本试验以花生网斑病病菌为研究对象，研究了蓖麻籽粗提物对花生网斑病病菌的生物活性，以期为花生网斑病的生物防治提供依据。1 材料与方法
11 供试材料
蓖麻籽购自青岛市李沧区农贸市场；网斑病病菌（Phoma arachidicola Marasas，Pauer & Boerema）由山东省花生研究所病害与微生物实验室分离、保存。
12 试验方法
121 蓖麻籽粗提物的制备 蓖麻籽粗提物采用索氏提取法抽提[8]。将蓖麻籽置于40～50℃烘箱中恒温干燥，粉碎后过0180～0425 mm孔筛。取50 g粉末，包好，放入提取器中（不超过虹吸管），再加入5倍植物粉末量的95%乙醇，抽提24 h后取出抽滤，旋转浓缩至1 g/ml （干物质量计），装入棕色玻璃瓶中，置4℃冰箱中保存备用。
122 对网斑病菌的生物活性测定 无菌条件下，将PDA培养基与粗提液充分混匀，粗提液浓度分别为50、100、200、300、500 mg/L，制备直径90 mm的固体平板培养基，以不添加粗提液的PDA培养基为对照。网斑病菌培养5天后，用灭菌的打孔器制备菌饼（直径为5 mm），将菌饼接种到固体培养基中央，每皿一块，菌丝面朝下放置，每处理重复3次。置于恒温培养箱内，28℃黑暗条件下培养，分别在24、48、96 h采用十字交叉法测量菌落直径，计算生长抑制率：
由表1可以看出，蓖麻籽粗提物在50～500 mg/L之间，花生网斑病菌均受到不同程度的抑制作用，且随着药剂浓度的增加，抑制率也增加。但随着时间的推移，抑制效果逐渐减小，24、48、96 h的EC50分别为2183、36727、43878 mg/L。3 讨论
随着人们食品安全意识的不断增强和对农产品农药残留问题的关切，利用非化学方法控制病虫害受到植物保护工作者越来越多的重视，开发对有害生物高效、对非靶标生物安全、对环境友好的生物农药己成为新的研究热点[8]。 蓖麻种子、
叶片中含有多种杀菌生物活性物质。本试验结果表明，蓖麻籽粗提物对花生网斑病菌在一定浓度范围内具有不同程度的抑制作用，随着时间的推移，抑制作用逐渐减小。其原因可能是由于非药剂因素随着时间的推移逐渐加强，从而消弱了药剂的作用。另外，抑制细菌生长需要粗提物的浓度较高，可能是由于提取的纯度不够，导致用药量过大。
蓖麻不同组织由于所含活性物质的成分和含量不同[5]，其对病菌的作用效果存在明显的差异。本试验只研究了蓖麻籽粗提物的杀菌作用，要有效利用蓖麻的生物活性物质进行植物病害防治，还需要对蓖麻不同部位活性物质的抑菌效果进行研究，并且对抑菌活性物质进行进一步分离纯化，真正的应用于生产还需做大量研究工作。参 考 文 献：
[1] 樊堂群， 迟玉成， 谢宏峰，等 不同抗性花生感染网斑病菌的酶活性及丙二醛含量变化[J] 花生学报， 2009，38（4）：31-34
[2] 徐秀娟，石延茂，徐明显，等 花生网斑病的发生与防治研究[J] 山东农业科学， 2009，4：29-30
[3] 文艳华， 冯志新， 徐汉虹， 等 植物抽提物对几种植物病原线虫的杀线活性筛[J] 华中农业大学学报， 2001，20（3）：235-238
[4] 黄家祥 蓖麻生产及综合开发利用技术[M] 北京： 中国农业出版社， 2005
[5] 温燕梅， 冯亚非， 郑明珠 蓖麻不同部位杀虫活性成分蓖麻碱的提取及含量[J] 农药， 2008， 47 （8）：584-585
[6] 吴雪平， 田雪亮， 项志锋 蓖麻籽水提物对黄瓜褐斑病菌的生物活性研究[J] 西北农业学报， 2006，15 （6）：215-216
[7] 吴雪平， 邓天福， 项志锋 蓖麻籽水提物对玉米小斑病菌的毒力测定[J] 古林农业科学， 2006，31（4）：43-44， 52
[8] 周福才， 顾爱祥， 周桂生， 等 蓖麻叶片粗提物对黄瓜瓜绢螟的作用[J] 中国生态农业学报， 2012，20（5）：629 -624