【摘 要】
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研究神经氨酸酶(NA)基因在体外培养NIH-3T3细胞中的表达定位.实验构建了真核表达栽体pcDNA3.0/EGFP-NA与pcDNA3.0-NA,采用聚乙烯亚胺介导基因转染法,分别转染NIH-3T3细胞,转
【机 构】
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扬州大学动物科学与技术学院,山西省河津市第二中学
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研究神经氨酸酶(NA)基因在体外培养NIH-3T3细胞中的表达定位.实验构建了真核表达栽体pcDNA3.0/EGFP-NA与pcDNA3.0-NA,采用聚乙烯亚胺介导基因转染法,分别转染NIH-3T3细胞,转染48 h后在荧光倒置显微镜下观察,并分别用RT-PcR与间接免疫荧光(IFA)进一步检测.结果表明:成功构建了EGFP-NA融合蛋白的表达栽体;RT-PCR检测到EGFP-NA融合蛋白的表达;NIH一3T3细胞EGFP标记观察显示绿色荧光分布在胞质近胞膜,细胞核内无绿色荧光;间接免疫荧光鉴定显示,绿色荧光分布在细胞膜内外,表达的重组NA蛋白定位在细胞膜上.
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