【摘 要】
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目的构建RNAi表达载体,并检验其对基因的抑制效果,从而在细胞中研究SURVIVIN基因的功能。方法(1)PCR扩增小鼠肝组织中的MU6启动子,并将其连接到TA载体中,构建带有MU6启动子的RN
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目的构建RNAi表达载体,并检验其对基因的抑制效果,从而在细胞中研究SURVIVIN基因的功能。方法(1)PCR扩增小鼠肝组织中的MU6启动子,并将其连接到TA载体中,构建带有MU6启动子的RNAi载体ps,并构建重组质粒psSURVIVIN和对照载体psN。(2)将psSURVIVIN及psN分别转染入HeLa细胞中,经过稳定筛选细胞,流式细胞术分析各组细胞周期及细胞凋亡率的影响因素,Western-blot和细胞免疫荧光检测两组细胞SUR-VIVIN蛋白质表达情况。(3)Caspase-Glo(tm)
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