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目的:克隆人cAMP依赖性蛋白激酶催化亚单位β基因(PRKACB),构建重组真核表达载体p EGFP-C1-PRKACB,并筛选其稳定转染肺癌细胞株。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从真核细胞中扩增得到人PRKACB的全长序列,克隆至表达增强型绿色荧光蛋白载体中,经酶切、PCR鉴定后测序证实克隆成功。将重组载体转至真核细胞,采用RT-PCR、Western blot技术检测外源基因PRKACB的表达。应用新霉素(G418)筛选出稳定转染p EGFP-C1-PRKACB的非小细胞肺癌细胞株