原发性胆汁性肝硬化动物模型的建立及外周血T淋巴细胞表面CD40配体分析

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目的 用聚肌苷酸胞苷酸(polyinosinic polycytidylic acid,PolyI:C)注射C57BL/6小鼠以研究建立原发性胆汁性肝硬化(PBC)动物模型,探讨CD40配体(CD40L)在外周血T淋巴细胞表面的表达,和在PBC中T淋巴细胞的活化情况.方法20只C57BL/6小鼠随机分对照组和模型组.将polyI:C以5 mg/kg的剂量腹腔注射模型组小鼠,对照组注射PBS,每周2次,120d后处死,留取外周血和肝组织,间接免疫荧光法检测血清抗线粒体抗体(AMA),HE染色观察胆管病理变化,生化分析仪测定血清碱性磷酸酶(ALP)含量,流式细胞术分析外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞所占比例及CD40L在T淋巴细胞表面的表达情况.结果PolyI:C注射120 d后模型组小鼠均出现AMA阳性,肝组织小胆管周围有不同程度的炎性细胞浸润,血清ALP明显高于对照组(P<0.001);对照组胆管及血清ALP均未发生明显变化;模型组小鼠CD40L+/CD4+、CD40L+/CD8+T淋巴细胞[(4.35±0.34)%,(1.42±0.10)%)显著高于对照组[(0.78±0.10)%,(0.43±0.04)%,P<0.01];而模型组小鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞所占比例[(25.83±1.80)%,(24.84±2.70)%]与对照组[(20.51±3.46)%,(17.84±1.53)%]比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论PolyI:C腹腔注射C57BL/6小鼠120d可引起PBC病变,活化的CD4+、CD8+ T淋巴细胞在PBC发病中起重要作用。

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