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目的
探讨人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导早衰过程中,氧化应激应答基因表达谱及端粒酶活力的变化。
方法按传代情况将人胚肺成纤维细胞分为年轻细胞(22 population doubling levels,22PDL)组、中年细胞(35PDL)组、复制性衰老细胞(49PDL)组和氧化应激诱导的早衰组PS。通过荧光定量PCR检测各组细胞中衰老相关的氧化应激应答相关基因(Foxo1、Foxo3、Pdx1、apoA-I、MMP1)的mRNA表达水平,分析过氧化氢对基因表达的影响。用ELISA方法检测不同衰老阶段细胞的端粒酶活力变化。
结果在人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中,与年轻细胞组比较,Foxo1、Foxo3、apoA-I及Pdx1的mRNA表达均逐渐降低,而复制性衰老细胞组MMP1表达明显升高至年轻细胞组的5.1倍,差异有统计学意义(P<0.05);与年轻细胞组比较,过氧化氢诱导的早衰阶段中Foxo1、Foxo3和apoA-I表达降低,Pdx1和MMP1表达明显升高,分别为年轻细胞组的2.3倍和6.2倍,差异有统计学意义(P<0.05)。年轻细胞组未检测到端粒酶活力,与年轻细胞组比较,中年及复制性衰老细胞组端粒酶活力增强;过氧化氢诱导的早衰阶段端粒酶活力明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论人胚肺成纤维细胞复制性衰老与早衰的基因表达存在差异,并受氧化应激修饰;细胞端粒酶活力随增龄呈升高趋势。