【摘 要】
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建立了用反相离子对色谱法同时精确测定产热凝胶粪产碱杆菌胞内中ATP、ADP、AMP、UTP、UDP、UMP、NADH、NAD+及UDP-glucose含量的方法。采用AgilentZorbaxSB-AqC18反相色谱柱
【基金项目】
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国家自然科学基金(20676055,20806034);国家高新技术863项目(2006AA02Z207)
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建立了用反相离子对色谱法同时精确测定产热凝胶粪产碱杆菌胞内中ATP、ADP、AMP、UTP、UDP、UMP、NADH、NAD+及UDP-glucose含量的方法。采用AgilentZorbaxSB-AqC18反相色谱柱(5μm,4.6×250nm),紫外检测波长为254nm,以乙腈-含10mmol/L四正丁基溴化铵的0.2mol/LNa2HPO4-NaH2PO4缓冲液(体积比10.5∶89.5)为流动相,流速为1.0mL/min时,成功分离了上述九种核苷酸,分离效果良好。且九种核苷酸的线性范围为10～100mg/L,回收率均在97%～104%之间,说明其准确度较好。相对标准偏差均在3%之内,说明本方法精密度和重现性均较好,且其最低检出限均在0.1～0.3mg/L之间。该方法为研究热凝胶发酵过程中粪产碱杆菌胞内的核苷酸变化和氧化-还原态趋势及其胞内的核苷酸水平和热凝胶生物合成的关系提供了基础。
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