aiiA基因原核表达载体的构建与表达

来源 :西北农林科技大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yxl122702985

【摘要】

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【目的】构建aiiA基因的原核表达载体,并进行诱导表达,检测aiiA蛋白的抗病性,为进一步通过转基因技术培育转aiiA基因植株奠定基础。【方法】从pMDTM19-T Vector+aiiA质粒中酶

【作者】

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欧阳乐军梁卓玲黄真池沙月娥曾富华

【机构】

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湛江师范学院生命科学与技术学院

【出处】

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西北农林科技大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2014年10期

【关键词】

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群体感应 AIIA基因 N-酰基高丝氨酸内酯 N-酰基高丝氨酸内酯酶 quorum sensing aiiAgene N-acyl-homoserine l

【基金项目】

：

国家“星火”计划项目(2012GA780019,2011GA780057),广东高校边缘热带特色植物资源工程技术开发中心项目(GC-ZX-B1002),广东省科技计划项目(2012A020602108),广东省自然科学基金项目(S2013040014690,S2012010008737),湛江市科技攻关项目(2011C3104010)

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【目的】构建aiiA基因的原核表达载体,并进行诱导表达,检测aiiA蛋白的抗病性,为进一步通过转基因技术培育转aiiA基因植株奠定基础。【方法】从pMDTM19-T Vector+aiiA质粒中酶切获得aiiA基因,将其与pGEX-4T-1表达载体连接构建重组原核表达载体pGEX-4T-1+aiiA,经双酶切及测序鉴定后,进行诱导表达,并对表达产物的功能进行鉴定。【结果】双酶切与PCR检测结果表明,重组原核表达载体pGEX-4T-1+aiiA构建成功。表达条件优化结果表明,在25℃下用0.2mmol/L

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