【摘 要】
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以花生种子总蛋白及其主要致敏糖蛋白Ara h1为研究对象,采用“一釜法”对蛋白上的糖链进行释放并同时进行衍生化标记,通过C18固相萃取柱纯化,以电喷雾质谱(ESI-MS)、多级串联
【机 构】
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西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室陕西省生物技术重点实验室西北大学生命科学学院,
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以花生种子总蛋白及其主要致敏糖蛋白Ara h1为研究对象,采用“一釜法”对蛋白上的糖链进行释放并同时进行衍生化标记,通过C18固相萃取柱纯化,以电喷雾质谱(ESI-MS)、多级串联质谱(MSn)和亲水性液相色谱-质谱联用(HILIC-MS)进行结构解析和定量分析.结果表明,蛋白Ara h1共有10条N-糖链,其中7条为高甘露糖型,2条为木糖修饰,另外1条为与过敏原相关的核心α1,3-Fuc修饰N-糖链,其含量约占总糖链的12.45%.
The total protein of peanut seed and its major allergenic glycoprotein, Arah1, were used as the research object. The sugar chain on the protein was released by the “one-pot method” and derivatized at the same time. The purified protein was purified by C18 solid-phase extraction ESI-MS, MSn and HILIC-MS were used for structural analysis and quantitative analysis.The results showed that there are 10 N- Among them, 7 were high-mannose type, 2 were xylose-modified and the other one was allergen-related core α1,3-Fuc modified N-glycan which accounted for 12.45% .
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