【摘 要】
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[目的]通过表达羊PrPc核心片段、单抗制备,最后建立免疫组织化学检测羊痒病方法.[方法]用PCR方法从小尾寒羊基因组DNA中扩增编码PrP^c核心片段DNA, 并克隆到硫氧还原蛋白融合
【机 构】
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南京农业大学动物医学院,农业部动物检疫所/国家外来动物疾病诊断中心
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(C02030606);农业部948项目(2001-366)资助
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[目的]通过表达羊PrPc核心片段、单抗制备,最后建立免疫组织化学检测羊痒病方法.[方法]用PCR方法从小尾寒羊基因组DNA中扩增编码PrP^c核心片段DNA, 并克隆到硫氧还原蛋白融合表达载体pET-32a（＋）上,转化至E.coli BL21,IPTG诱导融合表达.以纯化的重组小尾寒羊PrP^c核心片段免疫PrP^c基因敲除小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,制备羊核心片段单克隆抗体.[结果]通过上述方法,得到相对分子质量约为35 kD的重组小尾寒羊PrP^c核心片段,筛选出六株能稳定分泌针对小尾寒羊PrP
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