论文部分内容阅读
目的:探讨氯胺酮减轻小鼠脑缺血再灌注损伤的炎性反应与核转录因子κB(NF-κB)信号通路相关性.方法:将75只昆明小鼠随机分为5组:假手术(Sham)组、脑缺血再灌注损伤(I/R)组、氯胺酮低(50 mg·kg-1,ketamine-L)、高(100 mg·kg-1,ketamine-H)剂量组和尼莫地平(15 mg·kg-1,nimodipine)组,每组15只.除Sham组外,其余各组小鼠建立脑缺血再灌注模型.术后第3天,ketamine-L、ketamine-H和nimodipine组小鼠分别按相应剂量连续腹腔注射给药14 d,1次/d,Sham组和I/R组给予等体积生理盐水.各组小鼠在第1,7,14天进行神经功能缺失体征评分;水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力;TTC染色法测定各组小鼠脑梗死体积;苏木精-伊红染色(HE)染色观察各组小鼠脑组织病理变化;酶联免疫法检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)的含量;蛋白质印迹法(Western Blot)检测各组小鼠脑组织中NF-κB p65的表达;免疫组化法测定各组小鼠脑组织中NF-κB p65阳性细胞的表达情况.结果:与I/R组比较,ketamine-L组、ketamine-H组和nimodipine组小鼠各时间点的Longa评分显著降低(P<0.05或P<0.01);学习时间和记忆时间显著缩短(P<0.05或P<0.01);脑梗死体积显著减小(P<0.01);血清中TNF-α、IL-6含量显著降低,IL-10的含量显著增加(P<0.05或P<0.01);NF-κB p65蛋白表达明显降低(P<0.05或P<0.01);ketamine-H组和nimodipine组小鼠脑组织中NF-κB p65阳性细胞表达明显降低(P<0.05或P<0.01).nimodipine组、ketamine-H组与ketamine-L组相比,以上各指标差异均有统计学意义(P<0.05).Sham组小鼠海马区神经元细胞排列整齐,细胞结构完整,层次分明,无细胞核固缩现象;I/R组小鼠海马区神经元细胞排列紊乱,细胞体积明显缩小,大量细胞有核固缩现象,且胞浆减少;ketamine-L组、ketamine-H组和nimodipine组小鼠海马区神经元细胞排列较规则,细胞损伤程度较轻,部分细胞有体积缩小、细胞核固缩等现象.结论:氯胺酮通过影响NF-κB信号通路、降低TNF-α、IL-6及升高IL-10的含量来实现内源性保护作用,这可能与减轻炎症反应有关.