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目的 采用基因转染方法,以增强骨髓间充质干细胞(BMSCs)内源性胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因表达,观察BMSCs在内源性GDNF作用下分化.方法 分离、纯化大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定细胞表型分子.实验组以载鼠源性GDNF基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因重组腺病毒(Ad-rGDNF-GFP)转染第3代BMSCs,即BMSCsrGDNF-GFP转染组,对照组分别为BMSCsGFP转染组、未转染组(BMSCsNull组).转染72 h后察各组中BMSCs对GFP的表达.荧光定量聚合酶链反应(qPCR)比较各组BMSCs对GDNF基因表达水平.噻唑蓝(MTT)法测定各组细胞活力.分别于转染后3、7d对比观察各组BMSCs形态变化,免疫荧光检测各组BMSCs对神经核蛋白(NeuN)及低分子神经丝蛋白(NF-L)的表达.结果 全骨髓贴壁法可获取梭形贴壁细胞,低表达表型分子CD11b(1.4％)、CD34(1.5％),高表达表型分子CD29(99.8％)、CD90 (95.6％);转染72 h后,BMSCsrGDNF-GFP转染组、BMSCsGFP转染组均表达GFP,未转染组无GFP表达;统计学分析qPCR结果表明BMSCsrGDNF-GFP转染组细胞GDNF基因表达水平高于BMSCsGFP转染组与BMSCsNull组,且差异有统计学意义;统计学分析MTT检测结果表明BMSCsrGDNF-GFP转染组细胞活力于转染后3d显著高于对照组.转染后3、7d,免疫荧光鉴定结果证实BMSCsrGDNF-GFP转染组中细胞表达NeuN、NF-L,并呈现出较为典型的神经样细胞形态,对照组细胞无NeuN、NF-L表达,且细胞基本维持原梭形形态.结论 Ad-rGDNF-GFP转染BMSCs增强细胞内源性GDNF表达后,BMSCs可向神经样细胞定向分化,并保持较高的细胞活力.