【摘 要】
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在摇瓶和4L发酵罐上研究了营养和环境条件对重组菌E.coliM15(pQTPL)分批发酵生产酪氨酸酚裂解酶(TPL)的影响.在培养基中添加20g/L葡萄糖和1.0g/L玉米浆使TPL酶活提高到63.1U/
【机 构】
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江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江南大学医学院
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863)基金资助项目(编号:2006AA02Z153)
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在摇瓶和4L发酵罐上研究了营养和环境条件对重组菌E.coliM15(pQTPL)分批发酵生产酪氨酸酚裂解酶(TPL)的影响.在培养基中添加20g/L葡萄糖和1.0g/L玉米浆使TPL酶活提高到63.1U/g(干重).在此基础上,维持发酵液中溶氧水平为30%,可使菌体浓度在8h达到4.78g/L,酶活为54.6U/g,比对照组(不控制溶氧)分别提高了21%和31.6%.采用溶氧反馈调节-限制性补料策略,可使菌体浓度提高到31.5g/L.采用两阶段温度和pH控制策略,在发酵前8h控制pH7.0、温度37℃,8h至发酵结束之间控制pH为8.0、温度为30℃,可使重组菌的TPL酶活达到154.4U/g,并使TPL在细胞中过量表达,实现了高菌体浓度和高TPL酶活的统一.
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