目的 探讨白藜芦醇是否通过抑制糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)的活性进而阻止线粒体通透性转移孔(mPTP)的开放来发挥心脏保护作用,及其可能的信号转导机制.方法 常规培养大鼠胚胎心脏组织来源的H9c2细胞株,实验随机分为对照组、白藜芦醇组、白藜芦醇+PKG抑制剂(KT5823)组和KT5823组.激光扫描共聚焦显微镜成像法测定细胞线粒体膜电位(△Ψm)的变化及细胞内一氧化氮(NO)的含量.SABC法检测白藜芦醇对H9c2细胞GSK-3β Ser9位点磷酸化的影响.Western blot法检测磷酸化GSK-3β、血管扩张刺激磷蛋白(VASP)的表达水平.结果 共聚焦显微镜测定△Ψm结果显示,白藜芦醇组[减少到(81.9±1.1)％]能够抑制△Ψm的减少,与对照组[减少到(38.6±1.9)％]比较差异有统计学意义(P＜0.05).白藜芦醇+ KT5823组△Ψm[减少到(41.8±1.2)％]明显低于白藜芦醇组(P＜0.05).Western blot结果显示白藜芦醇组的磷酸化GSK-3β及VASP蛋白表达水平[分别为(160.6±3.6)％和(157.9±1.3)％]明显高于对照组(P＜0.01).白藜芦醇+ KT5823组的磷酸化GSK-3β及VASP蛋白表达水平[分别为(91.6±5.6)％和(98.0±0.5)％]明显低于白藜芦醇组(P＜0.01).KT5823组与对照组比较差异无统计学意义.SABC结果进一步显示,白藜芦醇组GSK-3β Ser9位点的磷酸化水平明显高于对照组(P＜0.01).共聚焦显微镜测定细胞内NO的结果显示,白藜芦醇组DAF-FM的绿色荧光强度与对照组比较差异无统计学意义[分别为(71.2±5.3)％和(77.0±5.4)％].结论 白藜芦醇通过cGMP/PKG信号通路抑制GSK-3β活性,进而阻止mPTP的开放来保护心脏.NO可能未参与白藜芦醇的线粒体保护作用。
糖原合成酶激酶3β在白藜芦醇诱导的大鼠心肌线粒体保护中的作用及其机制
【摘 要】
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目的 探讨白藜芦醇是否通过抑制糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)的活性进而阻止线粒体通透性转移孔(mPTP)的开放来发挥心脏保护作用,及其可能的信号转导机制.方法 常规培养大鼠胚胎心脏组织来源的H9c2细胞株,实验随机分为对照组、白藜芦醇组、白藜芦醇+PKG抑制剂(KT5823)组和KT5823组.激光扫描共聚焦显微镜成像法测定细胞线粒体膜电位(△Ψm)的变化及细胞内一氧化氮(NO)的含量.SAB
【机 构】
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063000唐山,河北联合大学医学实验研究中心心脏研究所,063000唐山,河北联合大学医学实验研究中心心脏研究所,063000唐山,河北联合大学医学实验研究中心心脏研究所,063000唐山,河北联合
【发表日期】
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2012年40期
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