成骨细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立

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构建了含有骨钙素基因启动子、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体pOC-Cre,以显微注射的方法将4.6 kb的转基因片段OC-Cre导入小鼠受精卵。16只子代小鼠中经PCR和Southern杂交鉴定,有2只小鼠携带外源基因,整合率为12.5%。为了检测OC-Cre在转基因小鼠中表达的组织特异性,将转基因首建者小鼠与基因组上携带有LoxP位点的条件性Smad4基因敲除小鼠交配,PCR结果显示,仅在子代纯合型小鼠骨组织基因组中扩增出了Cre介导重组后的片段。将OC-Cre转基因小鼠与ROSA26报告小鼠交配,利用LacZ染色对双转基因阳性子代小鼠进行检测,结果显示Cre重组酶在成骨细胞中特异性表达并介导ROSA基因座LoxP位点间的重组。所有这些结果说明:所建立的OC-Cre转基因小鼠在成骨细胞中特异性表达Cre重组酶,并能在体内介导成骨细胞基因组上LoxP位点间的重组,是一种理想的研制成骨细胞特异性基因敲除小鼠的工具小鼠。
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