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摘要：目的 通过采集腹泻学生的大便标本经实验室病原学诊断，查明引起该次腹泻的主要病原菌。方法 参考《病原生物学检验—细菌》将采集的大便标本进行增菌分离分纯培养、血清学鉴定、系统生化鉴定、药敏实验。结果 检出病原菌为福氏志贺氏菌2a型。结论 根据实验室病原学鉴定结果及临床症状显示，该次腹泻的暴发流行主要是因褔氏志贺氏菌2a型所致。
关键词：腹泻；褔氏志贺氏菌；病原学检测
2013年10月27日至11月1日，宁远县某小学多人出现腹泻，腹痛，呕吐，发热等症状，截止到11月1日21时共计腹泻人数46人，其中男生25人，女生21人，无死亡。大便为粘液便、脓血便、水样便、稀便，部分大便镜检脓细胞+++、白细胞+、吞噬细胞少量。经实验室血常规检查，发现白细胞总数升高。当地镇卫生院初步诊断为“感染性腹泻”。据椐发病时间和发病病例视为突发公共卫生事件，即报卫生主管部门和疾病预防控制中心。由宁远县疾病预防控制中心检验科采集患者大便标本共10份进行病原菌分离鉴定，并作药敏实验。现将病原学检测结果报告如下：
1 材料和方法
1.1 实验器材
生物安全柜，高压灭菌器，培养箱，各种实验用品。
1.2 培养基
GN增菌液，木糖赖氨酸去痒胆酸钠（XLD）平板，麦康凯（MAC）平板，营养琼脂平板，双糖铁（KIA）琼脂
1.3检测试剂
志贺氏菌属微量生化管和志贺氏菌属诊断血清，以上试剂均为杭州天和微生物试剂有限公司生产，均在有效期内使用。
1.4检测方法
参照卫生部病原生物学检验教材编写的《病原生物学检验—细菌》进行增菌分离培养和鉴定。
2病原学检测及结果
2.1 标本采集及分离培养
1）采样：分别采集未经药物治疗学生的大便10份（粘液便2份、脓血便1份、水样便3份、稀便4份）于无菌试管中，编号（1-10号）登记后一同送实验室进行致病菌的检测。
2）增菌：分别取1-10号样品适量按1：10比例接种到GN增菌液中，于 36°C±1°C增菌培养24h。
3）分离培养：取增菌后的培养物分别于XLD琼脂平板、MAC琼脂平板中分区划线接种后放36°C±1°C培养箱中培养24h，观察菌落形态特征。菌落形态特征如下：2、5、7、9号标本在XLD琼脂平板上形成无色、透明、光滑、湿润、凸起、边缘整齐、针尖大小的革兰氏阴性杆菌；在MAC琼脂平板形成较小菌落，光滑、湿润、凸起、边缘整齐、革兰氏染
色为革兰氏阴性的短小杆菌；1、3、4、6、8、10号标本在XLD琼脂平板、麦康凯琼脂平
板上均形成较大的菌落，形态各异、边缘整齐、红色的革兰氏阴性杆菌。将2、5、7、9号标本中的可疑菌落进行分纯。
4）分纯培养：挑取2、5、7、9号样品中的可疑菌落分别转种于双糖铁高层斜面培养基中于37°C恒温箱中培养24h后供血清学试验、系统生化试验、药物敏感试验和初步生化鉴定，初步生化鉴定结果见表1。
2.2 结果
样品经增菌培养、分离培养、分纯培养、血清学试验、生化试验后，在2、5、7、9、号样品中检出褔氏2a型志贺氏菌，1、3、4、6、8、10样品未检出致病菌。
2.2.1初步生化鉴定（KIA+MIU），结果见表1；系统生化试验，结果见表2。
3 结论 通过实验室的病原学鉴定结果显示，引起该次腹泻暴发流行的病原菌是福氏志贺氏菌2a型。
4 讨论 1）该次腹泻的暴发流行，共计46人，患病均入院治疗，其中男生25人，女生21人，无死亡，年龄在3-12岁，潜伏期为1-3天。2）志贺氏菌的致病力主要是侵袭力和毒素（毒素分内毒素和肠毒素），其中侵袭力是志贺氏菌致病力的主要因素，不论是产生内毒素还是外毒素的志贺氏菌，必须得先侵入人体的天然屏碍进入体内，在体内肠粘膜上皮细胞生长繁殖形成感染灶，引起炎症反应使肠粘膜上皮细胞死亡，脱落形成溃疡。A群个别血清型可产生毒力极强的细菌外毒素称为志贺样毒素又称为Vero毒素，能引起感染者出血性肠炎、溶血性尿毒症等严重并发症，已被国际社会列入生物武器核查清单剂中的11种生物毒素之一。3）福氏志贺氏菌2a型，是我国的优势血清型，也是导致此次腹泻爆发流行的致病菌。根据有关资料报道，其它地区也有很多该菌株引起菌痢流行的相关报道。4）本次药敏试验结果显示，头孢类药物对此型细菌是最为敏感的，在临床用药上应当首选头孢噻肟、头孢噻吩，其次为卡那霉素、先锋霉素、庆大霉素等。因此临床医生在选用抗生素时根据细菌感染的病原菌分离鉴定结果及药敏检测结果，正确选择有效的药物予以足量规范治疗，对提高治愈率，减少耐药菌株的传播及流行具有重要作用。
参考文献：
[1] 齐小秋 病原生物学检验---细菌[M]卫生部病原生物学检验教材编写组2009：294-305.
[2] 李树民，范元成 传染病疫情处理与预防控制[M].湖南科学技术出版社，2011：334-338.
[3] GB4789.5-2012食品安全国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验
关键词：腹泻；褔氏志贺氏菌；病原学检测
2013年10月27日至11月1日，宁远县某小学多人出现腹泻，腹痛，呕吐，发热等症状，截止到11月1日21时共计腹泻人数46人，其中男生25人，女生21人，无死亡。大便为粘液便、脓血便、水样便、稀便，部分大便镜检脓细胞+++、白细胞+、吞噬细胞少量。经实验室血常规检查，发现白细胞总数升高。当地镇卫生院初步诊断为“感染性腹泻”。据椐发病时间和发病病例视为突发公共卫生事件，即报卫生主管部门和疾病预防控制中心。由宁远县疾病预防控制中心检验科采集患者大便标本共10份进行病原菌分离鉴定，并作药敏实验。现将病原学检测结果报告如下：
1 材料和方法
1.1 实验器材
生物安全柜，高压灭菌器，培养箱，各种实验用品。
1.2 培养基
GN增菌液，木糖赖氨酸去痒胆酸钠（XLD）平板，麦康凯（MAC）平板，营养琼脂平板，双糖铁（KIA）琼脂
1.3检测试剂
志贺氏菌属微量生化管和志贺氏菌属诊断血清，以上试剂均为杭州天和微生物试剂有限公司生产，均在有效期内使用。
1.4检测方法
参照卫生部病原生物学检验教材编写的《病原生物学检验—细菌》进行增菌分离培养和鉴定。
2病原学检测及结果
2.1 标本采集及分离培养
1）采样：分别采集未经药物治疗学生的大便10份（粘液便2份、脓血便1份、水样便3份、稀便4份）于无菌试管中，编号（1-10号）登记后一同送实验室进行致病菌的检测。
2）增菌：分别取1-10号样品适量按1：10比例接种到GN增菌液中，于 36°C±1°C增菌培养24h。
3）分离培养：取增菌后的培养物分别于XLD琼脂平板、MAC琼脂平板中分区划线接种后放36°C±1°C培养箱中培养24h，观察菌落形态特征。菌落形态特征如下：2、5、7、9号标本在XLD琼脂平板上形成无色、透明、光滑、湿润、凸起、边缘整齐、针尖大小的革兰氏阴性杆菌；在MAC琼脂平板形成较小菌落，光滑、湿润、凸起、边缘整齐、革兰氏染
色为革兰氏阴性的短小杆菌；1、3、4、6、8、10号标本在XLD琼脂平板、麦康凯琼脂平
板上均形成较大的菌落，形态各异、边缘整齐、红色的革兰氏阴性杆菌。将2、5、7、9号标本中的可疑菌落进行分纯。
4）分纯培养：挑取2、5、7、9号样品中的可疑菌落分别转种于双糖铁高层斜面培养基中于37°C恒温箱中培养24h后供血清学试验、系统生化试验、药物敏感试验和初步生化鉴定，初步生化鉴定结果见表1。
2.2 结果
样品经增菌培养、分离培养、分纯培养、血清学试验、生化试验后，在2、5、7、9、号样品中检出褔氏2a型志贺氏菌，1、3、4、6、8、10样品未检出致病菌。
2.2.1初步生化鉴定（KIA+MIU），结果见表1；系统生化试验，结果见表2。
3 结论 通过实验室的病原学鉴定结果显示，引起该次腹泻暴发流行的病原菌是福氏志贺氏菌2a型。
4 讨论 1）该次腹泻的暴发流行，共计46人，患病均入院治疗，其中男生25人，女生21人，无死亡，年龄在3-12岁，潜伏期为1-3天。2）志贺氏菌的致病力主要是侵袭力和毒素（毒素分内毒素和肠毒素），其中侵袭力是志贺氏菌致病力的主要因素，不论是产生内毒素还是外毒素的志贺氏菌，必须得先侵入人体的天然屏碍进入体内，在体内肠粘膜上皮细胞生长繁殖形成感染灶，引起炎症反应使肠粘膜上皮细胞死亡，脱落形成溃疡。A群个别血清型可产生毒力极强的细菌外毒素称为志贺样毒素又称为Vero毒素，能引起感染者出血性肠炎、溶血性尿毒症等严重并发症，已被国际社会列入生物武器核查清单剂中的11种生物毒素之一。3）福氏志贺氏菌2a型，是我国的优势血清型，也是导致此次腹泻爆发流行的致病菌。根据有关资料报道，其它地区也有很多该菌株引起菌痢流行的相关报道。4）本次药敏试验结果显示，头孢类药物对此型细菌是最为敏感的，在临床用药上应当首选头孢噻肟、头孢噻吩，其次为卡那霉素、先锋霉素、庆大霉素等。因此临床医生在选用抗生素时根据细菌感染的病原菌分离鉴定结果及药敏检测结果，正确选择有效的药物予以足量规范治疗，对提高治愈率，减少耐药菌株的传播及流行具有重要作用。
参考文献：
[1] 齐小秋 病原生物学检验---细菌[M]卫生部病原生物学检验教材编写组2009：294-305.
[2] 李树民，范元成 传染病疫情处理与预防控制[M].湖南科学技术出版社，2011：334-338.
[3] GB4789.5-2012食品安全国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验