【摘 要】
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目的利用原核表达系统表达重组肿瘤型丙酮酸激酶（TUM2-PK），并制备TUM2-PK的单克隆抗体（mAb）。方法提取卵巢癌细胞株SKOV3的RNA，通过逆转录、PCR扩增TUM2-PK基因，将其分别与带有His标
【机 构】
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哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室
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目的利用原核表达系统表达重组肿瘤型丙酮酸激酶（TUM2-PK），并制备TUM2-PK的单克隆抗体（mAb）。方法提取卵巢癌细胞株SKOV3的RNA，通过逆转录、PCR扩增TUM2-PK基因，将其分别与带有His标签的pET-32a及GST标签PGEX-4T-1载体连接，转化DH5a菌进行基因克隆并测序鉴定。进一步构建表达体系，用异丙基β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，最终在BL21菌中表达TUM2-PK融合蛋白（分别含有His、GST-Tag），并进行SDS-PAGE及Westernblot鉴定。获得
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