【摘 要】
：
构建了以睡美人( Sleeping beauty,SB)转座子为载体元件、β-乳球蛋白质(β-lactoglobulin,BLG)为调控区的人乳铁蛋白质(Human lactoferrin,hLF)乳腺表达载体及增强型绿色荧
【基金项目】
：
高产优质转基因奶羊新品种培育项目;
论文部分内容阅读
构建了以睡美人( Sleeping beauty,SB)转座子为载体元件、β-乳球蛋白质(β-lactoglobulin,BLG)为调控区的人乳铁蛋白质(Human lactoferrin,hLF)乳腺表达载体及增强型绿色荧光蛋白质(EGFP)表达载体,便于验证SB转座子的转座效率,为hLF乳腺表达载体成功转染乳腺上皮细胞(GMC)奠定基础.采用PCR法从绵羊基因组中扩增5′、3′BLG,经TA克隆,在中间载体pcDNA3.1(-)的作用下,与hLF连接,得到pcDNA3.1(-)-BLG-hLF,然后与pT2连接,构建pT2-BLG-hLF；此外,还构建了pT2-BLG-EGFP.采用测序、酶切、PCR 3种方法鉴定阳性克隆,并用脂质体法将pT2-BLG-EGFP转染至GMC细胞中进行观察.分子鉴定结果:5′BLG、3′BLG克隆成功,pT2-BIG-hLF及pT2-BLG-EGFP构建正确；细胞鉴定结果:SB转座子介导的EGFP能在GMC细胞中高效表达.成功克隆了5′BLG、3′BLG调控区,并成功构建了乳腺表达载体pT2-BLG-hLF.
其他文献
目的：探讨剖宫产术后子宫瘢痕妊娠（ CSP）的MRI影像学特点，分析其对CSP的早期诊断价值。方法回顾分析2012年8月至2014年6月在温州医科大学附属第二医院临床拟诊CSP，并行盆腔3．0 T MR
目的：评价射频消融（ RFA）联合131碘肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体（131 I－chTNT）治疗原发性肝癌（ HCC）的疗效分析。方法回顾性分析浙江省丽水市中心医院2009年8月至2011年9月间38例临
目的：对膝关节置换术后感染进行二期翻修的病例进行微生物学和药敏分析。方法对自2007年1月1日至2014年2月28日解放军总医院骨关节科膝关节置换感染行二期翻修患者共78例患者
目的：观察人工全髋关节置换术（ THA）术中使用经皮多针刺技术对紧张挛缩的内收肌进行松解的疗效。方法自2008年1月至2012年12月，烟台市烟台山医院骨科治疗股骨头缺血性坏死和股骨
目的：了解中国部分地区初产妇和经产妇阴道助产分娩率的变化趋势。方法1993至2010年在浙江、江苏及河北26县（市）监测单胎孕妇1569381万名。孕妇基本信息和分娩资料源自监测记录
采用石墨电极对含α-氯代环己基苯基甲酮的氯化清洗水进行电化学降解。结果表明,电化学降解对COD的去除效果非常明显,并且随着电流密度增加,COD的去除效率逐渐升高,电流密度
目的:观察葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺陷症不同表型对恶性疟原虫感染的影响。方法:采用横断面研究的方式,将2012年雨季到马拉博地区医院就诊的2 690名比奥克岛当地居民纳入
目的:探讨新疆地区维吾尔族人群中纤维粘连蛋白(Fn)基因多态性与草酸钙结石易感性的关系。方法:采用病例对照研究,提取129例草酸钙结石患者(病例组)和94例健康人(对照组)外周
采用热重分析法及差示扫描量热法,在氮气气氛下分别以5,10,15,20℃/min的升温速率对四种废弃塑料(PP、PS、PE、PET)热解过程及其动力学进行了研究.实验结果表明:四种塑料聚合
为给贵州小香羊品种遗传资源的合理开发利用及进一步选育提供科学依据,同时为更全面地了解其种质特性提供基础资料,利用PCR-RFLP技术对67只贵州小香羊生长激素基因外显子1到