【摘 要】
：
目的探讨转录因子Ascl2对结肠癌细胞分化的影响。方法采用Ascl2分子干扰质粒和对照质粒对结肠癌HT-29和LS174T细胞进行转染,通过G418筛选建立稳定转染的细胞系,采用RT-PCR和W
【机 构】
：
第三军医大学西南医院全军消化病研究所,
论文部分内容阅读
目的探讨转录因子Ascl2对结肠癌细胞分化的影响。方法采用Ascl2分子干扰质粒和对照质粒对结肠癌HT-29和LS174T细胞进行转染,通过G418筛选建立稳定转染的细胞系,采用RT-PCR和Western blot方法检测干扰Ascl2分子表达对肠杯状细胞标志物Muc2和TFF3表达的影响。结果成功构建了shRNA-Ascl2/EGFP质粒以及对照质粒shRNA-control/EGFP,经测序与预期相符,G418筛选获得shRNA-Ascl2/HT-29、shRNA-Ctr/HT-29、shRNA-Ascl2/LS174T和shRNA-Ctr/LS174T稳定转染细胞。RT-PCR和Western blot检测证实干扰质粒能够有效地抑制HT-29和LS174T细胞内的Ascl2的表达(P<0.01)。RT-PCR检测发现Muc2和TFF3 mRNA表达水平在Ascl2干扰后的HT-29细胞内均明显上调(P<0.05);Muc2 mRNA表达水平在Ascl2干扰后的LS174T细胞内明显上调,差异有统计学意义(P<0.05),但是TFF3 mRNA表达水平在Ascl2干扰后的LS174T内升高不明显(P>0.05)。Western blot检测发现Muc2蛋白质表达水平在Ascl2干扰后明显上调(P<0.05)。结论干扰结肠癌HT-29和LS174T细胞内Ascl2的表达导致其向杯状细胞的表型分化。
其他文献
采用沸水回流法从灵芝子实体中提取多糖,经Sevage法除蛋白,乙醇沉淀,离心、透析、膜分离,浓缩、冻干后得灵芝多糖。经HIO4氧化、Smith降解及甲基化反应,并利用多糖及刚果红混
本文研究企业知识刚性理论及其应用问题。在对企业知识刚性进行概念界定与特征描述的基础上,本文详细论述知识时效性、知识效用强化和知识选择机制中的沉没成本效应三个因素
<正> 银化合物在教学实验室中是相当普通的试剂,常用于滴定卤素离子、检验还原糖、制银镜、摄影术及各种其它目的。然而,必须引起注意的是,在某些意想不到的情况下,有些银试
面子在人际交往中起着重要的作用,通过维护交谈双方的面子可以使谈话顺利进行。分别介绍了Goffman的"面子理论"及Brown和Levinson的"面子保全论",并指出这两种理论颇具影响力
<正>随着教育部《3-6岁儿童学习与发展指南》(以下简称《指南》)的颁布,各地自上而下都在研读与领会其内容与精神。本文将以大班音乐欣赏活动《狮王进行曲》为载体谈一谈如何
建构我国社会主义核心价值体系,必须以马克思主义理论为指导。劳动光荣的价值观来自马克思历史唯物主义的基本观点,而注重实效的准则与坚持实践是检验真理的唯一标准的辩证唯
近年来,用于城市排水管道检测的轮式移动机器人因其灵活性而受到人们的关注。轮式移动机器人为欠驱动系统,具有非完整约束,对其控制策略的研究可以促进非完整控制理论的发展
目的初步探讨1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]在葡聚糖硫酸钠(dextran sulfatesodium, DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)中的治疗效应及作用机制。方法30
<正>一、金融激励政策及实施措施支持保障性住房产业化发展的金融政策包括两个方面:一是鼓励开发企业以产业化方式建设保障性住房;二是鼓励购房者购买以产业化方式建设的保障
<正> 中学化学学生实验中要用到45种溶液,同种溶液（如NaOH溶液）在不同的实验中,浓度大小要求也不一样,浓度用大了浪费药品,浓度用小了实验现象不明显。如AgNO3溶液,做银镜反应