【摘 要】
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目的 探讨人脑神经胶质瘤U251的细胞活性与细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)表达的关系.方法 pEGFP-Timp1-Cyclin E1质粒体外转染上调U251细胞中Cyclin E1表达为Cyclin E1转染组,pE
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院,上海200011
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目的 探讨人脑神经胶质瘤U251的细胞活性与细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)表达的关系.方法 pEGFP-Timp1-Cyclin E1质粒体外转染上调U251细胞中Cyclin E1表达为Cyclin E1转染组,pEGFP-Timp1空载体质粒转染U251细胞为阴性对照组,常规培养U251细胞为空白对照组,荧光显微镜下观察并鉴定.CCK-8法检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移能力;RT-PCR检测Cyclin E1 mRNA表达水平;Western blot检测Cyclin E1、p-PI3K、p-Akt蛋白表达水平.结果 Cyclin E1转染组Cyclin E1 mRNA和蛋白表达水平明显高于阴性对照组和空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05);培养48、72、96 h时,与阴性对照组和空白对照组比较,U251细胞增殖水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05).Cyclin E1转染组的迁移细胞数为(528.05±51.83)个,明显多于阴性对照组(131.73±35.09)个、空白对照组(129.58±32.14)个,差异具有统计学意义(P<0.01).Cyclin E1转染组p-PI3K、p-Akt蛋白表达水平明显高于阴性对照组和空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05).结论 Cyclin E1表达上调能够明显增强人脑神经胶质瘤U251细胞的增殖和迁移能力,可能与激活PI3K/Akt信号通路有关.
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