【摘 要】
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采用二次硫酸铵沉淀和离子交换层析透过法分离溶菌酶,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测其纯度,研究鸡蛋清中溶菌酶的分离提取工艺。鸡蛋清原液用Tris-HCl缓冲液稀释5倍,
【机 构】
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丽水职业技术学院环境工程学院,昆明理工大学生命科学与技术学院
【基金项目】
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丽水市科技局校企项目(20080410)
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采用二次硫酸铵沉淀和离子交换层析透过法分离溶菌酶,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测其纯度,研究鸡蛋清中溶菌酶的分离提取工艺。鸡蛋清原液用Tris-HCl缓冲液稀释5倍,4℃下静置6 h,经50%硫酸铵沉淀后收集上清,再经80%硫酸铵收集沉淀后溶于pH 9.0的Tris-HCl后经Q-Sepharose FF阴离子交换层析直接在透过液中一步就可分离得到SDS-PAGE电泳纯的溶菌酶,酶比活由144.13 U·mg-1提高到2 235 U·mg-1,酶活提高超过15倍,回收率为15.76%。通过硫酸铵两级沉淀后只需收集Q-Sepharose FF阴离子交换层析的透过液即可分离得到溶菌酶,同时还可一次性制备其他中性和酸性蛋白,简化了工艺,降低了生产成本。
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