【摘 要】
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通过研究产氨短杆菌发酵产延胡索酸还原酶的代谢过程,优化提取条件,分离纯化出高酶活的延胡索酸还原酶,以还原石墨烯复合材料为基质构建新型酶电极传感器,用电极代替辅酶为体
【机 构】
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南京工业大学生物与制药工程学院,中牧南京动物药业有限公司,江苏省人民医院
【基金项目】
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国家重点研发计划专项(2016YED0201000)
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通过研究产氨短杆菌发酵产延胡索酸还原酶的代谢过程,优化提取条件,分离纯化出高酶活的延胡索酸还原酶,以还原石墨烯复合材料为基质构建新型酶电极传感器,用电极代替辅酶为体外代谢提供电子,实现生产放大过程中实时在线监测琥珀酸含量。研究表明:优化后的延胡索酸还原酶酶活可达83.22U/mL,纯化倍数达17.4倍,回收率为42%;循环伏安图法检测峰电位分别为-0.454V和0.432V,峰电流分别为-0.646μA和0.726μA,表明固定在电极表面的高酶活延胡索酸还原酶不仅保持一定的生物活性和催化活性,而且能实现高效监测琥珀酸含量。
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