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[摘 要]采用有机溶剂提取、均质过滤、水浴蒸干、浓缩定容相结合的方法，提取蔬菜中残留的敌敌畏、甲胺磷，用气相色谱法测定，再用保留时间定性，外标法定量。该方法能有效的排除成分物质的干扰，提取完全，最低检测限为0.5mg/kg，回收率为98.6%～108.4%，因此能广泛的应用到蔬菜的检验中。
[关键词]GC；甲胺磷；敌敌畏；定量；回收率
中图分类号：TS255.7；O657.71；TS202.3 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2017）30-0138-03
[Abstract]Extract the dichlorvos and the methamidophos left in vegetables by adopting organic solvent extraction methods， uniform filtration methods， water bath methods and concentration methods. Make determination by gas chromatography and then use remaining retention time method and external standard method to quantify. The interference of material composition can be excluded efficiently in this way and the extraction is complete. The lowest detection limit is 0.5mg/kg and the recovery rate is in the range of 98.6% ～ 108.4%. Thus the method can be widely used in the determination of the vegetables.
[Key words]GC； Methamidophos； Dichlorvos； Quantification； Recovery rate.
甲胺磷是一種高效有机磷杀剂，杀虫范围广，具触杀、胃毒和内吸作用，对危害粮、棉、果树等作物的多种害虫具有良好的防效，防治抗性蚜、螨，药效更优。抑制胆碱酯酶活性，造成神经生理功能紊乱。由于毒性强，在日本等部份国家已禁用，我国从2008年起亦公告停止生产及使用。敌敌畏是一种常用的环境卫生杀虫剂，对人畜中毒，对鱼类毒性较高，对蜜蜂剧毒。敌敌畏属有机磷农药广泛用于农作物杀虫、杀螨剂，还有家庭灭蚊、蝇。具有触杀、胃毒和熏蒸作用。触杀作用比敌百虫效果好，对害虫击倒力强而快。多见吸入或误服或用来自杀而中毒。甲胺磷、敌敌畏的检测已成为农药残留[1-2]的重要项目，其检测的方法[3-4]主要有高效液相色谱（HPLC）法[5-6]、高效液相色谱-质谱联用法（GC-MS）[7]、气相色谱（GC）法[8-11]、气相色谱-质谱联用法（GC-MS）[12-14]等，而气相色谱（GC）法是一种最普遍而相对简便的方法。通过摸索，采用有机溶剂提取、均质过滤、水浴蒸干、浓缩定容相结合的方法，建立一种应用气相色谱（GC）检测蔬菜中甲胺磷、敌敌畏的方法，其检测达到了很好的效果。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
洋葱
甲胺磷（标准品，99.5%）、敌敌畏（标准品，99.5%）、乙腈（色谱纯，99.5%）、丙酮（色谱纯，99.5%）、氯化钠（分析纯，99.5%）中国计量科学研究院、国药集团化学试剂有限公司、天津市科密欧化学试剂有限公司。
1.2 仪器与设备
岛津GC-2014C气相色谱仪（火焰光度检测器（FPD磷滤光片）） 日本岛津公司；XB220A型电子天平深圳市朗普电子科技有限公司；TDZ4-WS型台式高速离心机湖南湘仪实验仪器开发有限公司；KH5200DB型超声波清洗器上海乔枫实业有限公司；UPT—Ⅱ—20T型超纯水机成都超纯科技有限公司。
1.3 方法
1.3.1 色谱条件和参数
色谱柱：AT.20M-TPA（30m×0.25mm×0.25μm毛细管柱）；进样口温度：220℃，检测器温度：250℃，柱温：150℃（保持2min）→8℃/min→250℃（保持1min）；载气：氮气，纯度≥99.999%，流速为30mL/min， 燃气：氢气，纯度≥99.999%，流速为40mL/min，助燃气：空气，400mL/min。
1.3.2 标准曲线绘制
分别准确称取100mg（精确到0.1mg）甲胺磷、敌敌畏的标准品，用丙酮定容到1000ml容量瓶中，配制成1000mg/L的标准储备液，储存在-18℃以下的冰箱中。用丙酮将甲胺磷、敌敌畏储备液逐级稀释到浓度为0.0、0.25、0.5、1.0、2.0、5.0mg/L的标准工作液，经0.2μm 滤膜（有机溶剂滤膜）过滤后由浓度低到高分别取1μL 注入色谱仪进行检测，测定峰面积，以峰面积对浓度（mg/L）作标准曲线。
1.3.3 样品处理及测定
称取25g样品（精确至0.01g）放于均浆机中，加入50ml乙腈，在均浆机中高速均浆2min后过滤，将滤液收集到装有6g氯化鈉的100ml具塞量筒中，盖上塞子后剧烈震荡1min，在室温下静止15min，使乙腈相和水相分离。吸取20ml乙腈提取液，放入150ml烧杯中，将烧杯放在80℃水浴锅上，同时通入氮气或空气，蒸发近干加入5ml丙酮，再用约3ml丙酮分三次冲洗烧杯，最后定容至10ml，在涡旋混合器上混匀后移入2ml的自动进样瓶上机分析检测。定容后的样品溶液浑浊或有杂质时用0.2μm有机滤膜过滤后再进行分析检测。根据保留时间定性，外标峰面积定量。 2 结果与分析
2.1 柱温的确定
甲胺磷150℃以上全部分解，敌敌畏的沸点为74℃，柱温的初始温度在150℃左右最为合适。经试验发现柱温初始温度为150℃时效果最佳。
2.2 进样口温度的确定
进样口温度也就是汽化室温度，进样口温度的高低决定着样品是否能被完全汽化而被载气全部带入柱中。只有足够高的进样口温度才能使试样迅速气化而被载气带入分离柱中。在能够保证试样不分解的前提下，适当提高进样口温度对分离及定量都有利，特别是在进样量大的情况下进样口温度要足够高。一般情况下选择的汽化温度要比柱温高30℃～70℃，因为柱温初始温度在150℃最佳，所以汽化室温度应在180℃～220℃之间选择。通过在理论汽化室温度之间的试验确定最合适的汽化室温度为220℃。
2.3 检测器温度的确定
通过实验对比可知甲胺磷、敌敌畏的测定中检测器的最佳温度为250℃。
2.4 检出限
以样品被测组分峰高为基线噪音3 倍时的浓度为最低检出浓度，检出限为0.50mg/kg。
2.5 加标回收率的测定
不同浓度加标敌敌畏、甲胺磷的回收率分别为99.0%～108.4%和98.6%～102.6%，表2充分的说明了加标回收率范围。
2.6 样品测定分析
蔬菜中农药残留的现象比较多，实验中选取了一残留敌敌畏、甲胺磷的洋葱，图6是该洋葱的检测谱图，对该样品平行三次检测，加标回收率为102.3%～108.4%，完全符合最佳的加标回收率范围（90%～110%）。同时对该加标样品在高一级的省级实验室中采用气相色谱-质谱联用法（GC-MS）进行了检测比对，其检测结果和以上检测结果一样。可以充分说明该检测方法效果良好，能够广泛应用到蔬菜制品的检验检测中。
3 结论
本文建立了一种简便、快速、高效的利用气相色谱法检测蔬菜中敌敌畏、甲胺磷的方法，很好的提取了残留在蔬菜制品中的敌敌畏、甲胺磷，简化了检验检测的复杂过程，使其检测技术容易掌握，检测结果准确。在蔬菜农药残留的检验检测工作中具有很强的实用性和高效性。
参考文献
[1] 宋家铨，王新华，舒黎晔. 蔬菜中甲胺磷残留量调查分析[J].上海预防医学杂志，1999，（4）：161-162.
[2] 杨敏娜，孙成，塔娜.环境介质中有机磷农药残留分析方法[J]. 环境科学与技术，2006，29（6）：46-48.
[3] 赵荣飞，程劲松. 色谱法在有机磷农药残留分析中的应用[J].轻工科技，2012，3（3）：160.
[4] Y. Liang， W. Wang， Y. Shen， Y. Liu， X.J. Liu.Dynamics and residues of chlorpyrifos and dichlorvos in cucumber grown in greenhouse[J].Food Control， Volume 26， Issue 2， August 2012， Pages 231-234.
[5] 余长艳，蔡志敏.高效液相色谱法测定45%敌敌畏.马拉硫磷乳油[J].化工技术与开发，2006，35（2）.
[6] 成海亮，薛文平，徐恒振，等.5种有机磷农药标准物质高效液相制备技术的研究[J].环境科学与技术，2011，34（5）：113-116.
[7] 王雯，梁颖，沈燕，马尧瑶，钱建亚，刘贤进.液相色谱-串联质谱法检测黄瓜中5种有机磷农药残留.南京农业大学学报2012，35（1）：45-50.
[8] GB/T 5009.103-2003植物性食品中甲胺磷和乙酰甲胺磷农药残留量的测定[S].
[9] 王慧.气相色谱法测定韭菜中有机磷农药残留量[J].北京科技大学学报，2006，28（5）：427-429.
[10] 王玉枝，童玲，崔钥，等.微波萃取气相色谱法测定大米中的有机磷农药[J].湖南大学学报，2007，34（2）：64.
[11] GB/T 5009.20-2003食品中有机磷农药残留量的测定[S].
[12] NY/T 761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定[S].
[13] Liu M，Hashi Y，Song Y Y， et al. Simultaneous determination of carbamate and organophosphorus pesticides in fruits and vegetables by liquidchromatography-mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A，2005，1097（ 1 /2） ： 183-187
[14] GB/T 19648-2006 水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法 [S].
作者简介
劉兴斌（1966-），男，硕士研究生，酒泉市食品检验检测中心主任，主要领导酒泉全市食品檢验检测工作。
任兴权（1984-），男，工程师，硕士研究生，食品添加检测科负责人，主要从事食品中添加剂、重金属、农药残留的检验检测与分析研究。
[关键词]GC；甲胺磷；敌敌畏；定量；回收率
中图分类号：TS255.7；O657.71；TS202.3 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2017）30-0138-03
[Abstract]Extract the dichlorvos and the methamidophos left in vegetables by adopting organic solvent extraction methods， uniform filtration methods， water bath methods and concentration methods. Make determination by gas chromatography and then use remaining retention time method and external standard method to quantify. The interference of material composition can be excluded efficiently in this way and the extraction is complete. The lowest detection limit is 0.5mg/kg and the recovery rate is in the range of 98.6% ～ 108.4%. Thus the method can be widely used in the determination of the vegetables.
[Key words]GC； Methamidophos； Dichlorvos； Quantification； Recovery rate.
甲胺磷是一種高效有机磷杀剂，杀虫范围广，具触杀、胃毒和内吸作用，对危害粮、棉、果树等作物的多种害虫具有良好的防效，防治抗性蚜、螨，药效更优。抑制胆碱酯酶活性，造成神经生理功能紊乱。由于毒性强，在日本等部份国家已禁用，我国从2008年起亦公告停止生产及使用。敌敌畏是一种常用的环境卫生杀虫剂，对人畜中毒，对鱼类毒性较高，对蜜蜂剧毒。敌敌畏属有机磷农药广泛用于农作物杀虫、杀螨剂，还有家庭灭蚊、蝇。具有触杀、胃毒和熏蒸作用。触杀作用比敌百虫效果好，对害虫击倒力强而快。多见吸入或误服或用来自杀而中毒。甲胺磷、敌敌畏的检测已成为农药残留[1-2]的重要项目，其检测的方法[3-4]主要有高效液相色谱（HPLC）法[5-6]、高效液相色谱-质谱联用法（GC-MS）[7]、气相色谱（GC）法[8-11]、气相色谱-质谱联用法（GC-MS）[12-14]等，而气相色谱（GC）法是一种最普遍而相对简便的方法。通过摸索，采用有机溶剂提取、均质过滤、水浴蒸干、浓缩定容相结合的方法，建立一种应用气相色谱（GC）检测蔬菜中甲胺磷、敌敌畏的方法，其检测达到了很好的效果。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
洋葱
甲胺磷（标准品，99.5%）、敌敌畏（标准品，99.5%）、乙腈（色谱纯，99.5%）、丙酮（色谱纯，99.5%）、氯化钠（分析纯，99.5%）中国计量科学研究院、国药集团化学试剂有限公司、天津市科密欧化学试剂有限公司。
1.2 仪器与设备
岛津GC-2014C气相色谱仪（火焰光度检测器（FPD磷滤光片）） 日本岛津公司；XB220A型电子天平深圳市朗普电子科技有限公司；TDZ4-WS型台式高速离心机湖南湘仪实验仪器开发有限公司；KH5200DB型超声波清洗器上海乔枫实业有限公司；UPT—Ⅱ—20T型超纯水机成都超纯科技有限公司。
1.3 方法
1.3.1 色谱条件和参数
色谱柱：AT.20M-TPA（30m×0.25mm×0.25μm毛细管柱）；进样口温度：220℃，检测器温度：250℃，柱温：150℃（保持2min）→8℃/min→250℃（保持1min）；载气：氮气，纯度≥99.999%，流速为30mL/min， 燃气：氢气，纯度≥99.999%，流速为40mL/min，助燃气：空气，400mL/min。
1.3.2 标准曲线绘制
分别准确称取100mg（精确到0.1mg）甲胺磷、敌敌畏的标准品，用丙酮定容到1000ml容量瓶中，配制成1000mg/L的标准储备液，储存在-18℃以下的冰箱中。用丙酮将甲胺磷、敌敌畏储备液逐级稀释到浓度为0.0、0.25、0.5、1.0、2.0、5.0mg/L的标准工作液，经0.2μm 滤膜（有机溶剂滤膜）过滤后由浓度低到高分别取1μL 注入色谱仪进行检测，测定峰面积，以峰面积对浓度（mg/L）作标准曲线。
1.3.3 样品处理及测定
称取25g样品（精确至0.01g）放于均浆机中，加入50ml乙腈，在均浆机中高速均浆2min后过滤，将滤液收集到装有6g氯化鈉的100ml具塞量筒中，盖上塞子后剧烈震荡1min，在室温下静止15min，使乙腈相和水相分离。吸取20ml乙腈提取液，放入150ml烧杯中，将烧杯放在80℃水浴锅上，同时通入氮气或空气，蒸发近干加入5ml丙酮，再用约3ml丙酮分三次冲洗烧杯，最后定容至10ml，在涡旋混合器上混匀后移入2ml的自动进样瓶上机分析检测。定容后的样品溶液浑浊或有杂质时用0.2μm有机滤膜过滤后再进行分析检测。根据保留时间定性，外标峰面积定量。 2 结果与分析
2.1 柱温的确定
甲胺磷150℃以上全部分解，敌敌畏的沸点为74℃，柱温的初始温度在150℃左右最为合适。经试验发现柱温初始温度为150℃时效果最佳。
2.2 进样口温度的确定
进样口温度也就是汽化室温度，进样口温度的高低决定着样品是否能被完全汽化而被载气全部带入柱中。只有足够高的进样口温度才能使试样迅速气化而被载气带入分离柱中。在能够保证试样不分解的前提下，适当提高进样口温度对分离及定量都有利，特别是在进样量大的情况下进样口温度要足够高。一般情况下选择的汽化温度要比柱温高30℃～70℃，因为柱温初始温度在150℃最佳，所以汽化室温度应在180℃～220℃之间选择。通过在理论汽化室温度之间的试验确定最合适的汽化室温度为220℃。
2.3 检测器温度的确定
通过实验对比可知甲胺磷、敌敌畏的测定中检测器的最佳温度为250℃。
2.4 检出限
以样品被测组分峰高为基线噪音3 倍时的浓度为最低检出浓度，检出限为0.50mg/kg。
2.5 加标回收率的测定
不同浓度加标敌敌畏、甲胺磷的回收率分别为99.0%～108.4%和98.6%～102.6%，表2充分的说明了加标回收率范围。
2.6 样品测定分析
蔬菜中农药残留的现象比较多，实验中选取了一残留敌敌畏、甲胺磷的洋葱，图6是该洋葱的检测谱图，对该样品平行三次检测，加标回收率为102.3%～108.4%，完全符合最佳的加标回收率范围（90%～110%）。同时对该加标样品在高一级的省级实验室中采用气相色谱-质谱联用法（GC-MS）进行了检测比对，其检测结果和以上检测结果一样。可以充分说明该检测方法效果良好，能够广泛应用到蔬菜制品的检验检测中。
3 结论
本文建立了一种简便、快速、高效的利用气相色谱法检测蔬菜中敌敌畏、甲胺磷的方法，很好的提取了残留在蔬菜制品中的敌敌畏、甲胺磷，简化了检验检测的复杂过程，使其检测技术容易掌握，检测结果准确。在蔬菜农药残留的检验检测工作中具有很强的实用性和高效性。
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[10] 王玉枝，童玲，崔钥，等.微波萃取气相色谱法测定大米中的有机磷农药[J].湖南大学学报，2007，34（2）：64.
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作者简介
劉兴斌（1966-），男，硕士研究生，酒泉市食品检验检测中心主任，主要领导酒泉全市食品檢验检测工作。
任兴权（1984-），男，工程师，硕士研究生，食品添加检测科负责人，主要从事食品中添加剂、重金属、农药残留的检验检测与分析研究。