小金海棠二价铁转运蛋白基因MxIRT1定点突变的研究

来源 :园艺学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：slyde

【摘要】

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采用PCR技术对小金海棠（Malus xiaojinensis）二价铁转运蛋白基因MxIRT1的定点突变体系进行了探讨。根据MxIRT1开放阅读框（ORF）两端和突变位点序列各设计一对引物。通过PCR扩增，获

【作者】

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张学宁孔瑾王忆韩振海许雪峰

【机构】

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中国农业大学果树逆境生理与分子生物学实验室

【出处】

：

园艺学报

【发表日期】

：

2008年2期

【关键词】

：

小金海棠基因突变定点突变技术二价铁转运蛋白基因缺铁病 Malus xiaojinensis gene mutation site direct mu

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采用PCR技术对小金海棠（Malus xiaojinensis）二价铁转运蛋白基因MxIRT1的定点突变体系进行了探讨。根据MxIRT1开放阅读框（ORF）两端和突变位点序列各设计一对引物。通过PCR扩增，获得带有突变位点且在突变位点相互重叠的两个PCR片段。对以上两个片段的浓度进行调整后，将其用作PCR反应的模板。对退火温度和延伸时间进行优化后，利用ORF两端引物，将带有突变位点的两个片段拼接起来，从而获得了含有所要突变位点的MxIRT1，并将其插入pEASY-T2载体中。DNA序列分析表明在预期位点上

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