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目的
针对携带不同SOD1基因突变的肌萎缩侧索硬化(ALS)患者皮肤成纤维细胞进行SOD1突变蛋白表达和线粒体功能的探索。
方法活检获取2008—2012年北京大学第三医院神经内科门诊确诊的携带SOD1－V14M、SOD1－G16A、SOD1－C111Y基因突变的家族性ALS患者及年龄性别相匹配的健康对照皮肤组织，培养并建立成纤维细胞系；采用PCR扩增和直接测序的方法测定基因突变位点；共聚焦免疫荧光检测细胞内SOD1蛋白聚集量及线粒体膜电位变化；流式细胞仪检测活性氧(ROS)水平。
结果携带SOD1－V14M、SOD1－G16A、SOD1－C111Y基因突变的ALS病人成纤维细胞出现胞质SOD1蛋白异常聚集，三组突变的SOD1蛋白的浆核比与对照组相比分别升高2.54、2.80及3.25倍；成纤维细胞线粒体膜电位ΔΨm明显降低，红/绿荧光强度的比值相比对照组分别减少了36%、124%、142%；且细胞内ROS水平均较对照组增高了3.33、3.65、6.87倍。
结论在携带SOD1基因突变的ALS病人成纤维细胞内出现胞质SOD1蛋白异常聚集、线粒体功能异常及ROS水平改变，患者的外周组织成纤维细胞可作为ALS发病机制研究的有力工具，更益于将来可能的临床应用。