【摘 要】
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目的探讨香烟提取物(CSE)对骨骼肌细胞肌肉生长抑制素(MSTN)表达的影响。方法取新生3~5 d的SD大鼠的骨骼肌组织,用含150 ml/L胎牛血清的高糖DMEM培养基在37℃、5%CO2培养箱内
【机 构】
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南方医科大学,广东省人民医院呼吸科
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目的探讨香烟提取物(CSE)对骨骼肌细胞肌肉生长抑制素(MSTN)表达的影响。方法取新生3~5 d的SD大鼠的骨骼肌组织,用含150 ml/L胎牛血清的高糖DMEM培养基在37℃、5%CO2培养箱内进行体外原代细胞培养和传代。采用免疫荧光鉴定检测骨骼肌细胞。选择恰当的CSE浓度(2.5%、5.0%、10.0%)刺激48 h,分为2.5%组、5.0%组、10.0%组和对照组(不予CSE刺激),分别采用实时定量PCR检测MSTN mRNA的表达水平与Western blotting检测MSTN蛋白的表达水平。结果骨骼肌细胞培养成活率高,体外生长、增殖良好。实时定量PCR检测结果显示,4组MSTN mRNA相对表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中,5.0%组、10.0%组MSTN mRNA相对表达水平高于对照组和2.5%组(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,4组MSTN蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中,5.0%组、10.0%组MSTN蛋白表达水平高于对照组和2.5%组(P<0.05)。结论骨骼肌细胞模型可对CSE刺激产生有效反应,为吸烟引起骨骼肌抑制的机制研究奠定了细胞学基础。
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