【摘 要】
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目的构建抗甲胎蛋白（AFP）重链可变区（VH）单域抗体融合蛋白基因在大肠杆菌中的表达,并初步鉴定表达产物的活性。方法从已构建的抗AFP单链抗体（ScFv）的载体中,经PCR扩增出VH单域抗体
【机 构】
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四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室
【基金项目】
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四川大学科技创新基金资助项目（No.2004CF09）
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目的构建抗甲胎蛋白（AFP）重链可变区（VH）单域抗体融合蛋白基因在大肠杆菌中的表达,并初步鉴定表达产物的活性。方法从已构建的抗AFP单链抗体（ScFv）的载体中,经PCR扩增出VH单域抗体基因,再克隆到融合蛋白表达载体pET32a（＋）中进行表达;用SDS-PAGE及Western-blot鉴定表达产物;并通过竞争抑制ELISA分析TrxA-VH融合蛋白的结合活性;细胞免疫组化染色分析其内化及结合情况。结果VH单域抗体基因全长339 bp,将其克隆到pET32a（＋）中,转化大肠杆菌可获得高效表达,We
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