【摘 要】
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从人的黑素瘤细胞提取总RNA,进行RT-PCR,克隆了组织纤维溶酶原激活剂(tPA)基因,对其缺失突变,进一步克隆了溶栓药物瑞替普酶-reteplase(rPA)基因;以羊的β-乳球蛋白基因(BLG)
【机 构】
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中国药科大学生命科学院,上海杰隆生物工程股份有限公司
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从人的黑素瘤细胞提取总RNA,进行RT-PCR,克隆了组织纤维溶酶原激活剂(tPA)基因,对其缺失突变,进一步克隆了溶栓药物瑞替普酶-reteplase(rPA)基因;以羊的β-乳球蛋白基因(BLG)作为调控序列,构建了瑞替普酶的乳腺表达载体BrPA。注射BrPA到乳腺动脉,收集乳汁进行鉴定和检测,体外溶栓活性分析发现瑞替普酶在羊的乳腺中获得了表达,最高表达量为8.52 mg/L,为转基因动物乳腺表达载体构件的检测建立了合理的方法,也为下一步制备转基因奶山羊乳腺生物反应器奠定了基础;该研究提示,对于临床给药剂量小,而价格昂贵的药物,如细胞因子类,也许可以用这种乳腺瞬时表达系统进行生产。
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