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目的 检测肝外胆管癌组织中RASSF1A基因启动子甲基化及各CpG位点甲基化发生率.方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)和半巢式PCR对RASSF1A基因启动子区域进行扩增,并对扩增产物克隆测序.结果在全部48例肝外胆管癌组织中,RASSF1A基因启动子区域存在CpG位点甲基化现象的共28例,16个CpG位点甲基化平均发生率为42.45%,明显高于对照组(χ2=11.77,P<0.01).结论 RASSF1A基因启动子区域CpG岛甲基化是RASSF1A失活的主要机制,在肝外胆管癌的发生过程中发挥重要作用。